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标题: [求助]求MCF-7和MDA-MB-231培养方法经验 [打印本页]

作者: woshituzhu 时间: 2012-1-14 10:42 标题: [求助]求MCF-7和MDA-MB-231培养方法经验

我是一位刚刚进入实验室的新生，老板要求自己独立完成一项目。我现在用的是MCF-7和MDA-MB-231这两种细胞，放射治疗的影响，欲做倍增时间、生长曲线以及放射处理后的细胞凋亡的检测。请求各位不吝赐教，应包含哪些检测项目，具体指标和检测手段。
谢谢

作者: 一叶 时间: 2012-1-14 10:42

QUOTE:

原帖由 woshituzhu 于 2012-1-14 10:42 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我是一位刚刚进入实验室的新生，老板要求自己独立完成一项目。我现在用的是MCF-7和MDA-MB-231这两种细胞，放射治疗的影响，欲做倍增时间、生长曲线以及放射处理后的细胞凋亡的检测。请求各位不吝赐教，应包含哪些检测项 ...

MTT
流式，或WB

作者: 盼盼 时间: 2012-1-14 10:43

我也要养这两种乳腺癌的细胞，请教一下培养经验~~谢谢
MCF-7是不是必须用一次性的塑料瓶养呢？你用的什么培养条件呢？
MDA-MB-231我怎么养成圆形的了？

作者: woshituzhu 时间: 2012-1-14 10:46 标题: 回复 #3 盼盼的帖子

你好，对于MCF-7的培养我还是有些许的经验的：DMEM（高糖）+10%FBS+双抗，我用的BD的培养瓶，不是一次性使用，我会反复用的（一次的话太浪费了），这细胞很好养的，容易贴壁（4-6h左右），消化时我用0.5ml的胰酶1-2min即可，传代一般是一传二（传三也可以），36h到60h细胞长得最快。
MDA-MB-231这只细胞我一直希望得到，但是一直没有，经验就谈不上了，应该也差不多。
希望对你有帮助。

作者: 气泡 时间: 2012-1-14 10:47

MDA-MB-231培养条件也是DMEM（高糖）+10%FBS+双抗
这个细胞比较好养
梭形的

作者: 缘yuan 时间: 2012-1-14 10:47

有背景的吗，这两个细胞我都想要。。。实验室搬家太坑爹了，给-80断电，冻的细胞都完了。。。想死的心都有。。。。哪有大侠能给点MCF-7和231吗。。。感激不尽啊

作者: woshituzhu 时间: 2012-1-14 10:48 标题: 回复 #6 缘yuan 的帖子

MCF-7我有的 231就没有了

作者: 小野花 时间: 2012-1-14 10:48

你好，我查文献都是用L15培养基培养MDA-MB-231细胞，我自己是用DMEM培养的，但效果不太好，细胞总是会呈圆形，会漂浮，想请教下不知道是不是培养基的问题？还是有其它要注意的地方？

作者: woshituzhu 时间: 2012-1-14 10:50 标题: 回复 #8 小野花的帖子

培养基应该是L15的，同时，培养环境应该是无二氧化碳CO2

作者: 小野花 时间: 2012-1-14 10:50

5%的CO2不可以吗？要是我把盖子拧紧的话，是不是就可以相当于无二氧化碳的条件呢？

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