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标题: [求助]请问这是分离人PBMC中混杂的血小板还是黑胶虫？ [打印本页]

作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:14 标题: [求助]请问这是分离人PBMC中混杂的血小板还是黑胶虫？

本人连续几次分离人PBMC，24小时左右均发现在圆形的细胞中混有小园点以及短杆状东西，在不停的蠕动。有人说这是细菌污染，但培养液不混浊，继续培养24小时也未混浊，我在园子里搜了下发现有类似的照片说是血小板，请问这是血小板还是污染的细菌，还是其它东西？

镜下10*20

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作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:15

镜下10*40

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作者: xue258 时间: 2012-2-8 16:15 标题: 回复 #2 qhyu 的帖子

这是血小板。不要理睬它，培养几天后就没有了。

作者: vvmmoy 时间: 2012-2-8 16:18

赞同楼上I，绝对的血小板，它也会在液体中作阿米巴运动，如果有如此多的细菌，培养液肯定混浊！不要理睬它，培养几天后再换液就没有了

作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:19

谢谢。我想圆形的应该是血小板，请问那种呈短杆状的也是血小板吗？

作者: tianmei001 时间: 2012-2-8 16:19

你看到的东西是黑狡虫污染，它来自细胞培养用的血清，你更换培养基中的血清就可以了，也就是说你的血清有问题。那不是血小板

作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:20

你是指小圆形和短杆状的东西都是黑胶虫还是仅指短杆状物？还有我们实验室还有其他人用同一批次的血清，但他们的培养细胞中没有这种东西（他们不是养PBMC）。请问黑胶虫污染主要来源于血清吗？我也单独培养过培养基1640以及1640+胎牛血清，未出现这种东西。

作者: qumm1985 时间: 2012-2-8 16:20

1.是的,来源与血清,也可以来源于细胞,在培养基变酸(如颜色变黄)或者细胞裂解时可以出来,所以同一批血清培养不同的细胞或操作有误可出现
2.另外其是寄生性的,所以单独培养培养基(无细胞)不会出现的
3.其污染的特点是液体不浑浊,不停的蠕动,小圆形状

作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:21

那么请问群友，黑胶虫是否很快就会出现，因为我有一次分离好PBMC后过了一小时左右就发现这种东西，不会这么快就长出来吧？而且请问这与血小板如何区别呢？多谢

作者: chuntian1983 时间: 2012-2-8 16:21

我今天上午刚分离的DC，遇到同样问题，很烦恼，正在观察，以前好像不是这样，难道是血清的问题？我把洗过DC的上清液1800转离心后，出现白色沉淀样物，稀释后在镜下观察是大量小圆形和短杆状物，液体浑浊,短杆状物不停的蠕动，不知是血小板还是黑胶虫？请有经验的学长指教，多谢！！

作者: jrwyyplt 时间: 2012-2-8 16:23

如果是血小板，应该不会增殖吧？我在原代培养VSMC时也遇到了这样的问题，有黑色的圆形或杆状物体游动，但培养也是清亮的，细胞状态也不好了。那位大侠知道黑胶虫的来源，怎麽预防，亟盼解决的办法。

作者: BUK 时间: 2012-2-8 16:23

血清中可带有黑胶虫！如酵母菌污染，一般是串珠状存在，无明显运动，增殖快，培养基也不会明显变浊（很快变黄），但轻摇培养瓶时可见有浑浊！

作者: qhyu 时间: 2012-2-8 16:25

昨天我换了另一批胎牛血清培养,今天观察发现这种蠕动的东西少了些.不知道真的和血清有关还是这次分离得比较好.不过我请教了免疫学同学,他们认为这是血小板或者是细胞碎片.

作者: hold住 时间: 2012-2-8 16:25

我的现在也出现了这个问题培养基颜色变成亮黄色有很多的小的杂的细胞 PBS组没有这个现象不同的加样组也不一样，急求啊

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