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标题: [求助]EDTA怎么溶不了？急问！ [打印本页]

作者: yueban-1147 时间: 2012-3-10 10:09 标题: [求助]EDTA怎么溶不了？急问！

我要配制0.02%EDTA+0.125胰酶，但是EDTA在PBS溶液里却不溶，是PH值的问题？

作者: toy 时间: 2012-3-10 10:10 标题: 回复 #1 yueban-1147 的帖子

好像要用NaOH调PH为8

作者: star#room 时间: 2012-3-10 10:10

你应该先加热把它融了在加其他的

作者: 8964357 时间: 2012-3-10 10:10

用NaOH调至pH8.0 。

作者: idea2011 时间: 2012-3-10 10:13

在溶解试剂前应了解试剂的物理特性，下面是EDTA的溶解方法，希望对你有帮助：
在80ML水中加入18.61gEDTA-NA.2H2O,磁力搅拌器搅拌，用NAOH调节溶液的PH值至8.0（约需20gNAOH颗粒），此时方能溶解,定溶至100ml,然后稀释至你所需浓度。

作者: yueban-1147 时间: 2012-3-10 10:13

谢谢！PH值调至8后，待EDTA溶解后，还需将PH值再调回7.4吗？还有，这样配制（18.61g+100mlH2O)的浓度算20%？

作者: 大白菜 时间: 2012-3-10 10:15

最后所有的东西都配好了，定容之前在调整pH值。

作者: caihong 时间: 2012-3-10 10:15

EDTA一般在pH8.0左右开始溶解，因此最好用NaOH调节pH至8.0

作者: gogo 时间: 2012-3-10 10:16

0.02% EDTA在pH6左右就可以溶解了，不应该调到PH8，而且胰酶在碱性条件下容易失活的。

作者: ero11 时间: 2012-3-10 10:17

我们买了两种EDTA一种是Na盐，另一种不是Na盐的。前者很容易就溶解了，而后面的那种我用磁力搅拌搅了好久，还加热也溶不了。后来我一直用Na盐了。

作者: qumm1985 时间: 2012-3-10 10:17

EDTA.2Na与EDTA的效果有什么区别吗？

作者: 黄花菜 时间: 2012-3-10 10:18

好象在效果上没有什么区别

作者: yychen 时间: 2012-3-10 10:18

调ph先！~~~~~~~~~~~~

作者: zzzz 时间: 2012-3-10 10:19

我们的做法是先配置PBS+0。02%的EDTA，而后再在溶解好的溶液中加入胰酶，挺好容的，你可以试一下

作者: 66+77 时间: 2012-3-10 10:20

太好办，用超声波

作者: S6044 时间: 2012-3-10 10:20

我的方法是D-HANKS+EDTA+胰酶，溶解很完全，效果很好

作者: duoduo 时间: 2012-3-10 10:21

乙二胺四乙酸是四元酸，由于乙二胺四乙酸在水中的溶解度比较小，而其二钠盐在水中的溶解度却比较大。因些在实际应用中人们常采用EDTA二钠盐,它含有2个结晶水，有时候也叫EDTAⅢ，但是习惯上仍然把它称为EDTA ，用它消化细胞最大的缺点是影响细胞的贴壁，所以要把培养瓶和细胞反复的洗至少2次~~

作者: TAT 时间: 2012-3-10 10:21

EDTA二钠盐应该不是很难溶,我试过常温下0.5%水溶液就很好溶.不过要多搅拌!

作者: milkdog 时间: 2012-3-10 10:23

配消化液用得着这么麻烦吗？D-HANKS+胰酶挺好用的。

作者: redbutterfly 时间: 2012-3-10 10:24

用固体NaOH调节溶液pH至8.0时即可溶解EDTA。溶解需要一定的时间，请耐心配制。

作者: mimili_901 时间: 2012-3-10 10:26

这个东东是比较难容，多晃动几下耐心点就好了。还有加热也是不错的选择，

作者: woshituzhu 时间: 2012-3-10 10:26

加NaOH调pH就可以了，上次我也是这样的

作者: ladyhuahua 时间: 2012-3-10 10:26

是这样的吗　
当定容１００毫升后，PH值变化了　EDTA就不会再析出了吗　
再说在PH８的时侯加入胰酶　会不会变性
菜问题　　刚准备做　没实践经验　还望指教啊

作者: junjie05 时间: 2012-3-10 10:27

我的方法是这样的，将称好的EDTA溶到定量的PBS液中，可适当加热助溶。然后（冷却后）加入胰酶，过滤，保存。希望能对你有用，也希望和大家交流！

作者: xueyouzhang 时间: 2012-3-10 10:27

我10月5日刚配置了200ml的胰酶+EDTA消化液，胰酶浓度：0.05%，EDTA浓度：0.02%
方法如下，肯定没问题，相信“大灵通”，（按100ml计算）
1、取胰酶0.05g,EDTA0.02g,加入烧杯（最好不用EDTA2Na或EDTA4Na,因为用1乘PBS已经是等渗，再加离子就不是等渗，原则是这样，我没试过EDTA2Na或EDTA4Na）
2、取1乘PBS（即0.01M)100ml，调PH为7.6-8.0,最好不要过8.0,，否则就太碱了），倒入烧杯。
3、放磁力搅拌器搅拌30分钟。一定会溶。
EDTA的确不好溶，没有磁力搅拌器的话，就只好辛苦您了。
溶解过程中千万不可加热，胰酶会被灭活的呀！
要不你先不加胰酶，就可以加热，把EDTA先溶喽，然后再加胰酶也可以。不过好象麻烦一点，没必要。
虽然有的教科书说可以不加EDTA，但我觉得不好，消化的很慢，半拉咔叽的，建议您还是用EDTA。

作者: one 时间: 2012-3-10 10:29

胰酶应该是0.25g呀，呵呵，不好意思。

作者: 8964357 时间: 2012-3-10 10:31

在溶解试剂前应了解试剂的物理特性，下面是EDTA的溶解方法，希望对你有帮助：
在80ML水中加入18.61gEDTA-NA.2H2O,磁力搅拌器搅拌，用NAOH调节溶液的PH值至8.0（约需20gNAOH颗粒），此时方能溶解,定溶至100ml,然后稀释至你所需浓度。
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急急!!你的EDTA量怎么那么多，我的是EDTA2Na，应该怎么配制呢?

作者: fqswdzd 时间: 2012-3-10 10:32

EDTA一般都可用其二钠盐代替的，大多数应用研究上没什么区别的。一定要用非钠盐时，可用NaOH调节pH溶解，但最终形成的还是钠盐。

作者: misswu61 时间: 2012-3-10 10:34

我们实验室配胰酶的方法：
1、用PBS做基础液，先溶EDTA（不用钠盐），加入酚红后可根据颜色来估计　PH值，很方便。加NaOH颗粒，PH值调到7.6至7.8，在磁力搅拌器上一会儿　就溶了
2、在1的溶液中加入胰酶，调PH做到7.6，定溶过滤就ok了

作者: bananapeople 时间: 2012-3-10 10:35

我们一般不加EDTA，用生理盐水（PBS同样）溶解胰酶，水浴37度，大概半小时，稍微加点1N NaOH，然后过滤除菌就可以。

作者: milkdog 时间: 2012-3-10 10:36

我的方法是D-HANKS+EDTA+胰酶，溶解很完全，效果很好

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我们也是这样的，而且EDTA有2钠盐和4钠盐两种,后者不易溶解,前者很好用的.

作者: dog002 时间: 2012-3-10 10:37

用EDTA钠盐，EDTA很难溶于水，而他的钠盐易溶于水！

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