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标题: [求助]细胞出问题了不知道是不是污染 [打印本页]

作者: any333 时间: 2012-3-15 17:55 标题: [求助]细胞出问题了不知道是不是污染

我养的是LNCaP细胞，真是一波三折麻烦不断啊。
开学以来，我第一次复苏了一瓶，2天后观察细胞没怎么贴壁，放弃了。又复苏一次，开始状态还好好的，有了2瓶，长得还行。那天传代成4瓶，传完后观察也没有什么问题，可是两天后我准备换液了（这个细胞长得很慢，而且贴壁性不是很强，所以一般都是2天内不去动它），结果一看不得了，4瓶细胞全军覆没，培养基呈现浑浊，镜检下发现液体中漂满了黄色的一小团一小团的东西，不知道只是死去的细胞还是什么？也不知道是不是污染了，如果是，是何种污染？打开瓶盖闻了闻，无异味，师兄说那么应该不是细菌，但不知道到底是怎么回事了。感觉养细胞不确定性好大啊！大家帮忙分析分析吧！谢谢了！
以下是从培养瓶里拍的，可以看到培养液出现浑浊。
对了怎么一次多传几张图片啊？难道只能一张一张发？

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:55

显微镜下

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:55

还有

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:56

~~~~~~~~~~~~

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:56

继续。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:56

总是出错啊。。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:57

。。
崩溃了怎么老是说是太短啊。。
。。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:57

继续上图请求大家分析

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:57

还有

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:58

显微镜下就是密密麻麻的黄色。。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:58

继续发图继续发图。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:58

这个到底是怎么回事啊是污染吗？

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作者: any333 时间: 2012-3-15 17:59

有的地方还能看到底层有细胞的轮廓。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:06

还能看到点细胞影子。。

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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:07

各位同仁，帮帮小弟吧！细胞培养经验少，实在不知道这个是属于什么情况，应该怎么去分析判断或者用什么方法去鉴定原因？
下面贴一张正常的LNCaP细胞图片，是以前细胞状态好的时候拍的。

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作者: ritou1985 时间: 2012-3-15 18:07

上面的几张图片貌似污染了，细胞旁边的模糊的线状的像是细菌。如果你的培养液浑浊了。而且高倍可以看见穿梭的细菌，应该是污染了。

作者: any333 时间: 2012-3-15 18:07

回ls：培养液确实浑浊了，但是没有异味呢，我听说细菌污染的话会有异味的。我是用相机对着目镜拍的，你说的穿梭的细菌是怎么回事？怎么穿梭？

作者: any333 时间: 2012-3-15 18:08

再补充几张图片后来又出现了同样的情况物镜拍了4倍镜、20倍镜、40倍镜大家看看是怎么回事？

4倍的

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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:08

20倍的如下

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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:08

40倍的如下

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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:09

补充一张 40倍的照片本来是很大的可以放大了看但是文件太大传不上来我就压缩了再传的
下面放一张上面那张照片放大了截取的

图片附件: 41635897.snap.jpg (2012-3-15 18:09, 54.35 KB) / 该附件被下载次数 3
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作者: any333 时间: 2012-3-15 18:09

大家帮忙分析分析吧这个细胞到底是污染了还是怎么了？多谢了！

再补充一张40倍物镜下正常细胞的图片可以与上上张比较显示正常细胞在这个倍数下的大小

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作者: redbutterfly 时间: 2012-3-15 18:09

再高倍仔细看一下，有没有运动，
如果小颗粒有动的话，肯定是污染了
或者隔一两天明显增多的话，基本上也是污染了
或者换液养养，脏东西不减少，或者很快增多，也是污染

作者: any333 时间: 2012-3-15 18:11

再高倍仔细看一下，有没有运动，
如果小颗粒有动的话，肯定是污染了
或者隔一两天明显增多的话，基本上也是污染了
或者换液养养，脏东西不减少，或者很快增多，也是污染

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高倍镜下观察的时候小颗粒是静止的晃动瓶子的时候它会动说明是悬浮的但是不动的时候它自己不会动的
你看这个图片小颗粒像是细胞碎片呢？还是像某种细菌或者什么的？

作者: TAT 时间: 2012-3-15 18:11

那肯定是污染了

作者: ero11 时间: 2012-3-15 18:13

肯定是污染了我养过的细胞也是这样污染的但是不知道是什么污染有人说是细菌有人说是支原体

作者: remenb 时间: 2012-3-15 18:13

楼主这是霉菌污染，我碰到过这样的情况，夏天的时候如果不注意，是很容易霉菌污染的。我养PC-3 细胞的时候就遇到这样的情况，后来我全部丢掉了，救补回来

你会发现这东西细胞状态好的时候会被细胞覆盖，但是你传代的时候这东西又会长出来，看似漂在培养基里，但是洗不掉的。

作者: kswl870 时间: 2012-3-15 18:14

你知道怎么补救吗？我的也污染了那个东西，但是现在还不是很严重，怎么及时补救？

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