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标题: [分享帖 ]用于细胞爬片的盖玻片处理 [打印本页]

作者: ritou1985 时间: 2012-3-18 10:21 标题: [分享帖 ]用于细胞爬片的盖玻片处理

前些日子做了细胞的免疫化学，盖玻片的处理步骤很复杂，找了好久才从一个师姐那里学到步骤，爬片效果也不错，与大家分享：
自来水浸2h，浸酸过夜，自来水冲洗干净，95%乙醇浸12h,70度烤干，高压处理，涂一层多聚赖氨酸（0.025mg/ml），室温包被4h，DD水冲洗10遍，无水乙醇冲洗，超净台风干。
盖玻片易碎，处理时动作要轻，还有一次多处理一点，备用。

作者: fsdd817 时间: 2012-3-18 10:21

谢谢介绍！但是无水乙醇冲洗能保证无菌吗？

我要在紫外灯下照射一夜呢！

作者: gemei0115 时间: 2012-3-18 10:22 标题: 回复 #2 fsdd817 的帖子

没看仔细吧！“95%乙醇浸12h,70度烤干，高压处理，”
后面还有个“高压处理”呢！

作者: chuntian1983 时间: 2012-3-18 10:23

请问，浸酸是浸1％的盐酸吗？谢谢！

作者: zhenxin 时间: 2012-3-18 10:23

这个步骤在无菌台进行吗？如果不是那么这样处理之后怎么灭菌？

作者: dongdongqiang 时间: 2012-3-18 10:26 标题: 回复 #5 zhenxin 的帖子

应该是常用来消毒的硫酸吧!

作者: ha111 时间: 2012-3-18 10:27

我觉得盖玻片不好用！
我用载玻片，玻璃刀裁成理想大小，洗衣粉刷洗，酸缸里过夜，冲洗后高压，用起来舒服。

作者: kewanqi2011 时间: 2012-3-18 10:27

请问，浸酸是浸1％的盐酸吗？谢谢！

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习惯上称为“浸酸”，实际是重铬酸钾和硫酸配成的“清洁液”，专用于玻璃制品的“清洁”。

作者: ritou1985 时间: 2012-3-18 10:28

知道了，谢谢两位哦！因为做病理切片时的盖玻片都是浸1%盐酸的，所以确认一下。

作者: 66小飞侠 时间: 2012-3-18 10:28

前些日子做了细胞的免疫化学，盖玻片的处理步骤很复杂，找了好久才从一个师姐那里学到步骤，爬片效果也不错，与大家分享：
自来水浸2h，浸酸过夜，自来水冲洗干净，95%乙醇浸12h,70度烤干，高压处理，涂一层多聚赖氨酸（0.025mg/ml），室温包被4h，DD水冲洗10遍，无水乙醇冲洗，超净台风干。
盖玻片易碎，处理时动作要轻，还有一次多处理一点，备用。

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麻烦你把细胞爬片的做法告诉我好吗，谢谢！

作者: zhezhe 时间: 2012-3-18 10:29

我不知道细胞爬片的尺寸，告诉我好吗，谢谢。

作者: zhezhe 时间: 2012-3-18 10:30

我看的书上说只要在75％的酒精中浸泡，然后使用时在火焰上烤干就可以了，要那么麻烦啊？

作者: 49888 时间: 2012-3-18 10:30

我们用的也是盖玻片

作者: 2541 时间: 2012-3-18 10:31

我处理盖玻片的具体做法是：
将买来的盖玻片一片一片的放入盛酸的烧杯中过夜，自来水冲洗后，一片一片的分开晾干后，一片一片的放于95%的酒精中浸泡4-6小时，用三蒸水涮洗两次，分开晾干。用前将它们一片一片的放入光滑的纸中高温高压消毒，再用多聚赖氨酸包备就可以用了。

作者: ladyhuahua 时间: 2012-3-18 10:31

请问怎么用赖氨酸包被？是侵在赖氨酸4小时吗？

作者: 33号 时间: 2012-3-18 10:32

我消毒的方法是：
将盖玻片剪成合适大小，先洗衣粉泡，超声洗20min.冲干净后再在一容器中泡酸过夜，再用双蒸水洗15遍，再用双蒸水泡24h，其间每2-4h摇动几分钟后换液继续。后再高压灭菌，烘干后备用。用前紫外消毒。如果用酒精消毒的话，一是盖玻片易碎，二是残余酒精对细胞有损坏。不过我采用此法，没有用赖氨酸包被细胞贴壁都几好。

作者: xevin 时间: 2012-3-18 10:32

请问：多聚赖氨酸（0.025mg/ml怎么配置啊？配置完后用再灭菌吗？怎么灭菌呀？万分感谢！！！急用，请指教啊！

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