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标题: [求助]人乳腺癌MDA-MB-231细胞形态 [打印本页]

作者: eric930 时间: 2012-3-20 11:36 标题: [求助]人乳腺癌MDA-MB-231细胞形态

我养了一周人乳腺癌MDA-MB-231细胞，从细胞公司买了配套的DMEM培养基，传代后部分用四季青的血清，部分用细胞公司给的进口血清，胰酶消化后没有离心直接倒掉的。现状态不好，致电公司说是没有离心的缘故。请教各位是否是这回事？另请问南京哪里有做荧光光度计分析？我用的是近红外染料Cy5.5，激发波长694nm。谢谢！附细胞照片

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作者: ha111 时间: 2012-3-20 11:37

很多人做细胞实验加胰酶后吸掉，不离心的。倒掉好像不合理吧，培养瓶里残留太多。
但我几次比较发现，不离心的细胞状态要差一些，我用的胰酶是含EDTA的。所以现在基本上是离心的，不过我有师兄一直不离心，细胞一样养的很好的。

作者: woshituzhu 时间: 2012-3-20 11:39

MDA-MB-231我养过，这个细胞株不太容易适应新的环境。但从你的照片看，问题不大；这个细胞贴壁，过几天换个液就ok了；同时，可以适当增加血清浓度，等长起来了，就很强悍的了，呵呵

作者: eric930 时间: 2012-3-20 11:39

MDA-MB-231我养过，这个细胞株不太容易适应新的环境。但从你的照片看，问题不大；这个细胞贴壁，过几天换个液就ok了；同时，可以适当增加血清浓度，等长起来了，就很强悍的了，呵呵

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这种细胞真的这么敏感么？我用的胰酶也和公司的不一样（桃红色/无色），后来有离心换液，但还不行，公司说是培养箱的问题,得用进口的（我们实验室是国产的），公司说细胞库来源是保密的，只说是国内的，现在得重新买一瓶来养，我现有的材料和仪器能让细胞好好活着么？它们就不能慢慢适应么？

作者: 园丁## 时间: 2012-3-20 11:40

细胞传代无需离心，直接吸掉大部分，留下少部分加入培养基就可以了。
孵箱只要能够保持稳定的温度和CO2供应，进口的还是国产的不会有很大区别。
看你图片上的细胞状态还是可以的。
如果细胞长的慢，可以在传代时增加留下的细胞数，培养基中的胎牛血清的比例也可以适当增加，等其达到正常的指数生长期时再恢复到常规培养条件。
另外，建议用培养板养，多传几个孔，分开来传代和培养，这样可以选择状态好的细胞用于后续传代和实验。

作者: greenbee 时间: 2012-3-20 11:44

我养了一周人乳腺癌MDA-MB-231细胞，从细胞公司买了配套的DMEM培养基，传代后部分用四季青的血清，部分用细胞公司给的进口血清，胰酶消化后没有离心直接倒掉的。现状态不好，致电公司说是没有离心的缘故。请教各位是否是这回事？另请问南京哪里有做荧光光度计分析？我用的是近红外染料Cy5.5，激发波长694nm。谢谢！附细胞照片

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这图片也太奇怪了。跟ATCC的很不一样，跟我的也不一样。我是从上海细胞所买的，开始用DMEM养，杭州四季青的血清，没传几次代就变圆了，后来就买了L-15，还可以。不知道你是在哪个公司买的？差别太大了。

作者: DDD 时间: 2012-3-20 11:46

这细胞状态不对，正常的231细胞不会这么纤细，由于你后续更换了国产血清，现在很难判断时细胞源有问题还是血清导致的。胰酶消化一般不需要离心，但你要确定胰酶消化没有过度。这个细胞很好消化，加了胰酶后，让其均匀覆盖，然后马上吸掉，然后37度消化2min不到就应该可以了。

如果刚复苏没更换国产血清前也是如此形态，而且培养基用的是好的培养基，可以确定是细胞来源就不好。

作者: eric930 时间: 2012-3-20 11:47

从原公司又买了一株，培养基一致，慢慢换成四季青胎牛血清，消化没有过度，状态又不一样了，增殖倒还算快。师兄说有的细胞需要特殊的氨基酸，这细胞需要么?附两照片，前者为刚买来时的，后者为现在的。

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作者: eric930 时间: 2012-3-20 11:48

现在的细胞状态

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作者: eric930 时间: 2012-3-20 11:48

明显的营养不良啊，请各位大虾指教

作者: xingyi08 时间: 2012-3-20 11:49

我从上海细胞库买的，现在也出现了大量细胞团的现象，不知道是怎么回事，我用的是高糖DMEM加10%进口胎牛血清。同问各位！谢谢

作者: zsxan1990 时间: 2012-3-20 11:50

我原先的MDA-MB-231细胞是直接从dana farber cancer institute运过来的,可惜呀,用了2年后，居然把这个细胞没保好种,没了.无奈之下，从上海细胞库买,但发现MDA-MB-231细胞有问题,存在大量漂浮成团的圆形亮点,肯定有问题.现在用的是人家生物公司用的细胞,状态也没从美国寄来的好，只能将就一下了.

作者: yes4 时间: 2012-3-20 11:50

“从上海细胞库买,但发现MDA-MB-231细胞有问题,存在大量漂浮成团的圆形亮点”我的也是，哎，会不会细胞已经老化了？

作者: pengke1983 时间: 2012-3-20 11:51

上海细胞库很多细胞不给力啊~~~

作者: redbutterfly 时间: 2012-3-20 11:51

我从上海细胞库买的也是很多圆的，气死了，肯定是那的细胞有问题，我看文献上很多用DMEM养的

作者: misswu61 时间: 2012-3-20 11:52

我从上海细胞库买的也是很多圆的，气死了，肯定是那的细胞有问题，我看文献上很多用DMEM养的

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ATCC上是用L-15养的，但上海的细胞可能传代多了，老了

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