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标题:[求助]关于脐静脉内皮细胞的原代培养

remenb[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是不是血细胞啊？
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remenb[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下你的细胞大概几小时能贴壁呢，我也在养huvec，消化出来的时候还挺多的，第二天（18小时左右）也看到大半的贴壁细胞，谁知道换液后细胞就少了很多，好像贴的不牢，你有这种情况吗？我看你上面那张图是三天以后的细胞形态，蝌蚪状应该是对的，可我的细胞现在是第二天，没有那种形态，是圆形的，是不是要等三天后才可以看出形态呢？
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8princess8[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的基本第二天就有很好的贴壁形态，多角形
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yapuyapu[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的怎么一直都没有贴壁的形态呢，请大家帮忙分析一下原因哦，我用的是1640的培养基，是不是培养基不行啊？
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发表于 2012-3-21 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1640可能不行，换DMEM+20%FBS试试！
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
为什么1640不行啊，我看有很多文献也是用的1640,我用的是0.25%胰酶消化10分钟左右.
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8princess8[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

好像没有文献说是单用胰酶的吧？就算是为了省钱，也基本是胰酶和胶原酶1:1的比例啊
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我看得文献上有单用胰酶消化的，难道是这方面的问题吗？你只用的胶原酶吗，自己配的还是买的别人配好的呀，文献上说单用胰酶可以消化8-12分钟左右。你现在养的怎么样了，我今天看了一下我的基本没有内皮细胞，我觉得都像是细胞碎片，你的那些会动的黑点点是什么东西啊。
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-3-21 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你的双抗是怎么配的，胶原酶是哪种呀，谢谢哦！我现在养的很郁闷，基本没有收获。
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发表于 2012-3-21 16:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看着不太像黑胶虫，应该是一些细胞的碎片吧！我也在做HUVEC的原代分离，现在做的情况是，细胞的贴壁状况不好，不知道这个明胶是不是好用啊？
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