小中大看了大家的讨论,想再说几句:
1、美国的细胞培养实验室一般都设在普通的屋子里,我在美国差不多呆过5、6个实验室,也见过不少其他的实验室,还没有见过细胞培养室单独特殊建造的。相反我发现国内的不少细胞培养室单独按照无尘车间的要求建造。究其原因,可能是因为国内的空气中粉尘比较多,污染的可能大些,所以对培养室的建造上反而下工夫。另外可能是因为国内无尘车间的施工便宜。在无尘车间中培养细胞,毫无疑问会减少污染的机会。但其施工成本,以及维护成本(无尘车间的过滤系统是要定时清洗和更换的,我担心不少的实验室以为造好车间就万事大吉了),还有进出的不便利,是不是值得,有待探讨。
2、就我在国外细胞培养实验室和我们公司的细胞培养实验室工作的经验,细胞培养室不需要一个异常洁净的环境。一般来说,地板如果是光滑容易清洗的(地坪漆、大理石、瓷砖均可),墙面使用不会剥落粉尘的油漆,窗户一般不要打开。这样的房间,只要定期(1-2天)拖地,就足够达到需要的洁净度了,因为真正的洁净环境是在超净台内。
3、回到要不要使用酒精灯的问题。首先在超净台内使用酒精灯的目的显然不应该是产生一个无菌的气相,因为超净台内的气相本来就是无菌的,所以使用酒精灯的目的,就是把有可能在瓶口的细菌杀死。那么只要在瓶口有合适的保护,就不需要了。我们实验室一般使用的培养液瓶在灭菌的时候,都会在盖上包上锡泊纸,使用过程中拿下,用完后又包上。所以我们是不使用酒精灯的。
在我看来,使用酒精仍然是从以前超净台技术比较差,或者是从普通场合中的无菌操作(比如普通实验室中一些分子克隆的操作)延袭而来的。在细胞培养的超净台内并不需要。有人提到美国的实验室中也有人使用酒精灯的,我的观察是在美国实验室中使用酒精灯的人往往是年纪比较大的人,或者一些照搬他们技术的人。