细胞世界

我所在的实验室有用于培养细胞的超净台，内置酒精灯一个。老师传授授说在打开培养瓶或培养液之前要用酒精灯的火焰快速的烧一下，目的是消毒，减少污染。自己很怀疑这样做的有效程度，因为瞬间的火焰不可能将瓶口的温度升高很多，又如何达到消毒的目的呢？
在网上搜索后找到一些资料，认为不应在超净台内使用火焰。现将其放到丁香园上供大家参考，希望有经验的同学给个说法，超净台内到底应不应该有酒精灯。

Open flames are not required in the near microbe-free environment of a biological safety cabinet. On an open bench, flaming the neck of a culture vessel will create an upward air current which prevents microorganisms from falling into the tube or flask. An open flame in a BSC, however, creates turbulence which disrupts the pattern of HEPA-filtered air supplied to the work surface. When deemed absolutely necessary, touch-plate microburners equipped with a pilot light to provide a flame on demand may be used. Internal cabinet air disturbance and heat buildup will be minimized. The burner must be turned off when work is completed. Small electric "furnaces" are available for decontaminating bacteriological loops and needles and are preferable to an open flame inside the BSC. Disposable sterile loops can also be used.
摘自：cuturl('http://www.cdc.gov/od/ohs/biosfty/bsc/BSC2000sec5.htm')

事实上使用酒精灯会造成空气对流，从而带起超净台面上的灰尘，反而增加污染的机会。更何况还增加了火灾的隐患。
摘自：cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/thread/6028528')

The flaming of lips of tubes and flasks must ALWAYS be done whenever culture liquid is to be poured from a container (e.g., pouring plates). Flaming should be routinely done when caps are removed from tubes during transfer of cultures. The purpose of flaming is not to sterilize, but to warm the tube and create warm air convection currents up and away from the opening. This "umbrella" of warm, rising air will help to prevent the entrance of dust particles upon which contaminating bacteria reside.
摘自：cuturl('http://structbio.vanderbilt.edu/chazin/wisdom/labpro/sterile.html')

受到加分的鼓励，把CDC这段生物安全柜的文章翻译了。错误之处，万望指正，谢谢。译文如下：
在生物安全柜几乎没有微生物的环境中，明火是不需要的。在开放的操作台上
（BSC之外)，通过灼烧培养瓶口，可以创造一个向上的气流，预防携带微生物的尘埃坠落入试管或培养瓶。而在一个生物安全柜中，明火产生扰动气流，破坏了供向操作台面的洁净空气的流向。如果真的确实需要明火，可以使用装备控制火焰大小的微型灯具。这样，柜内空气扰动和加热效应会减少到最低。需要火焰的操作结束后，必须关闭灯具。另外，相对于在生物安全柜内使用明火，更好的选择是使用电气化的“熔炉”来消毒接种环和接种针。一次性的无菌环也是一个选择。

————————————————————————————————————————————————————————————————

个人觉得：生物安全柜和超净台是两个不同的概念。
国内使用的超净台是不能和生物安全柜比的，这么简单的超净台根本做不到无菌的环境（可以说是个开放的空间），所以超净台内用酒精灯还是有必要的。
我们实验室在生物安全柜内，没需要不用酒精灯的，在普通的超净台内一定要用酒精灯的，不用的话细胞肯定死翘翘了。
大家都是明白人，都不希望用酒精灯，多麻烦呀。可我们又买不起生物安全柜，所以只能将就使用国货（超净台）了，国货＋酒精灯，绝配，符合国情，^_^。

看了大家的讨论，想再说几句：

1、美国的细胞培养实验室一般都设在普通的屋子里，我在美国差不多呆过5、6个实验室，也见过不少其他的实验室，还没有见过细胞培养室单独特殊建造的。相反我发现国内的不少细胞培养室单独按照无尘车间的要求建造。究其原因，可能是因为国内的空气中粉尘比较多，污染的可能大些，所以对培养室的建造上反而下工夫。另外可能是因为国内无尘车间的施工便宜。在无尘车间中培养细胞，毫无疑问会减少污染的机会。但其施工成本，以及维护成本（无尘车间的过滤系统是要定时清洗和更换的，我担心不少的实验室以为造好车间就万事大吉了），还有进出的不便利，是不是值得，有待探讨。

2、就我在国外细胞培养实验室和我们公司的细胞培养实验室工作的经验，细胞培养室不需要一个异常洁净的环境。一般来说，地板如果是光滑容易清洗的（地坪漆、大理石、瓷砖均可），墙面使用不会剥落粉尘的油漆，窗户一般不要打开。这样的房间，只要定期（1-2天）拖地，就足够达到需要的洁净度了，因为真正的洁净环境是在超净台内。

3、回到要不要使用酒精灯的问题。首先在超净台内使用酒精灯的目的显然不应该是产生一个无菌的气相，因为超净台内的气相本来就是无菌的，所以使用酒精灯的目的，就是把有可能在瓶口的细菌杀死。那么只要在瓶口有合适的保护，就不需要了。我们实验室一般使用的培养液瓶在灭菌的时候，都会在盖上包上锡泊纸，使用过程中拿下，用完后又包上。所以我们是不使用酒精灯的。

在我看来，使用酒精仍然是从以前超净台技术比较差，或者是从普通场合中的无菌操作（比如普通实验室中一些分子克隆的操作）延袭而来的。在细胞培养的超净台内并不需要。有人提到美国的实验室中也有人使用酒精灯的，我的观察是在美国实验室中使用酒精灯的人往往是年纪比较大的人，或者一些照搬他们技术的人。

——————————————————————————————————————————

非常赞同,实验过程中要明确我们的目的,能够满足实验需求就行了,看情况决定用与不用!