离子交换树脂，用0-1.5M NaCl梯度洗脱，很难洗下来

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标题:[未解决]离子交换树脂，用0-1.5M NaCl梯度洗脱，很难洗下来

[未解决]本主题悬赏可用分 10

sd71469190[使用道具]
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发表于 2012-3-26 10:31 资料个人空间短消息加为好友

小中大

采用沸水提取植物根皮，茎皮，叶。提取液茎超滤，去掉了分子量小于5000的分子，然后冷冻干燥后，直接上离子交换树脂，用0-1.5M NaCl梯度洗脱，很难洗下来（目标成分多糖）。请问各位前辈，可能原因及解决方案，非常感谢啊。

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miracle 2012-3-27 21:19 可用分 +3 鼓励发起讨论，欢迎经常交流。。 ...

njyyyil[使用道具]
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发表于 2012-3-27 11:44 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你可以用醇水提取，可能会引入一些极性小的杂质

xiongwei397[使用道具]
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发表于 2012-3-27 13:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

应该用80度的水提取才可以啊，然后脱蛋白，脱盐，上大孔也可以啊

swn_nyve_vb[使用道具]
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发表于 2012-3-27 13:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室的那位同学是先检测了多糖的含量，用的是苯酚硫酸法，分离用的是凝胶，然后用GPC做的检测

ross_racheal[使用道具]
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发表于 2012-3-27 15:09 资料个人空间短消息加为好友

小中大

为什么用树脂分呢？我感觉你的洗脱剂最好是拿Sephadex G系列的凝胶进行分离，你最好先用液相测定一下分子量在选择相应的凝胶型号，我那时候就是这么分离的，效果很好，祝楼主顺利

sd71469190[使用道具]
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发表于 2012-3-27 17:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们用沸水提取的目的就是模拟中药煎煮，然后研究其中的多糖。但沸水提取的杂质太多，糖含量只有10%不到。

现在国外老板叫我直接上，效果不好，用脱盐柱洗了之后，上样效果依然不好啊

现在我估计是沸水提取物其他杂质太多，影响分离效果，我们是用的ANX 4 fast flow，阴离子交换树脂。

我们测了多糖含量了，大约10%，目前想法是先有离子交换树脂分离后再用凝胶，可现在就是离子交换树脂效果不好，很难分离。

maomi520[使用道具]
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发表于 2012-3-29 13:26 资料个人空间短消息加为好友

小中大

水提醇沉法，好要脱蛋白，脱色素浓缩

kflsjjfdl[使用道具]
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发表于 2012-3-29 13:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

看来大家都一样，我们测得多糖含量也是10%，正愁着呢。不过我用大孔树脂测了一下，现在的含量提高到40%了，100%水洗下来的就是多糖，但是老师问我那60%是什么我答不上来了，唉。用离子交换是个好方法，你可以控制一下条件

kamiu[使用道具]
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发表于 2012-3-29 17:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

手段很多很多，比如你提后用试用不同尝试的醇沉，用不同精度的柱子超滤，或者后期不同温度沉淀都会有不错的效果

eesa_dc_seein[使用道具]
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发表于 2012-3-29 17:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

弱弱问一句，为什么选用离子交换树脂呢？你的糖不带电荷吧？我觉得可以选用凝胶柱。

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