液相色谱

HPLC1200主动阀上通向柱子的管路堵

昨天下午换了流动相，当时很清楚的记得管路里的气泡是已经排干净的，结果今天被告知管路里全是气泡，流动相里的过滤头都有气泡了而且主动阀上通向柱子的管路也堵了，这是什么原因呢？ 柱子是新领用的，用之前的一个晚上用乙腈流速0.5ml/min冲了15个小时，这还有个小问题，液相新柱子活化的时候，流速多少，冲洗时间多久最合适呢？柱子另一端接了检测器，是否对检测器有影响？ 回到主题，之后还用流动相和乙腈走梯度走了接近3个小时，这过程是走的乙腈空白。空白走的6针里，在10分钟左右会出现面积大小不等的峰，分析时间是31分钟。下午同事告诉我，走出来谱图还是有很多不确定的东西，不过今天出的这些不确定的峰跑到19分钟了。是柱子没冲洗干净 吗？以上是详细的现象说明，请帮忙分析下是什么原因呢？感谢各位大大们了

新柱子用甲醇或乙腈冲半个小时就足够了，流速从0.1ml/ml 10分钟内逐渐过度到1ml/ml就行。
每天开机前，流动相应该先超声半小时，开机后，先将泵排液阀打开排10分钟气泡。

保留能够重现的未知峰的出现可能与管路和泵没有关系，而是进样系统的故障。

主动阀上通向柱子的管路？这是个什么东西。

流动相里的过滤头都有起泡了，说明流动相曾经跑空过啊，主动阀通向柱子的管路堵了，之前用过缓冲盐吗？是不是没置换干净？感觉柱子问题不大，可能是系统管路内或流通池有污染。可以短路柱子看看是否还有那么多鬼峰

新主子的活化，应该参考随柱的说明书，一般就是普通HPLC不高于1ml/min,甲醇水或乙腈水冲洗过夜，接不接检测器都没影响

1、一种可能就是流动相没有过滤干净，另外是过滤头污染了，气泡是由过滤头产生的。还有就是楼上说的，流动相是不是走光了。
2、主动阀上通向柱子的管路也堵了，这个是如何判断出来的，如果是管路堵了，可以把管路入在热水里超声试试。

这个应该考虑流动相太脏，导致滤头堵塞，所以才会有气泡
主动阀上通向柱子的管路是不会堵的。
泵里进入气泡，流量和流速都不对，所以走出来的峰会不对

可能是流动相走没了，污染物或是缓冲盐堵了管路

楼主是不是跑空过液相，柱子进气泡了

管道脏了或者流动相不互溶导致！