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标题:[求助]293t细胞悬浮培养的条件

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2012-3-26 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
用2.0ml离心管啊~~~6孔的细胞足够了

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请问把死细胞和悬浮的活细胞离心分开的转速应控制在多少转呢？怎么处理呢？谢谢
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2541[使用道具]
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发表于 2012-3-26 17:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问把死细胞和悬浮的活细胞离心分开的转速应控制在多少转呢？怎么处理呢？谢谢

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一般控制在500rpm，3——5min
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-3-26 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问驯化过程要在摇床上进行吗？还是直接去静止平放在培养箱中就行了呢？谢谢哦

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如果你的细胞现在是静置贴壁培养，那么在培养基更换的驯化过程前期（细胞在开始漂浮生长之前）继续用静置培养，而后用摇床低速（~60rpm）培养。如果细胞本就是摇床培养的，那整个过程中还是需要摇床培养。
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eric930[使用道具]
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发表于 2012-3-26 17:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果你的细胞现在是静置贴壁培养，那么在培养基更换的驯化过程前期（细胞在开始漂浮生长之前）继续用静置培养，而后用摇床低速（~60rpm）培养。如果细胞本就是摇床培养的，那整个过程中还是需要摇床培养。

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大家好，我养的是重组的CHO细胞，转染并且挑取单克隆后得到几株表达较高的细胞株，但是在将该细胞株从10%血清驯化至无血清悬浮培养的过程中，血清下降至1%时细胞大量成团，有的漂浮有的贴壁，蛋白表达量也逐渐降得很低了，请问有经验的朋友可否给予些指导，感激不尽！
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