细胞世界

我想做一个microRNA对肿瘤细胞侵袭能力的影响，我没做过问个很低级的问题哈，是先把细胞种到小杯子上再转染还是先在孔板里转染好后再消化下来种到小杯子上？我的感觉是种上后再转染。但我不知道转染的方案和孔板里一样吗？

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感谢您的问题。
个人感觉是不是应该先转染，再评价转染效率，之后才能开展后继实验？

我还想问一个问题：用24孔板做Transwell（8μm孔径）侵袭实验的话下室应该加好多培养基比较合适呢？

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您好，Corning推荐24孔的transwell下腔加0.6ml，上腔0.1ml。

你好，我想请教，最近看了篇文献讲应用transwell侵袭实验筛选出转移能力强的肿瘤细胞，通过十轮的transwell侵袭实验，最终从原始肿瘤细胞系筛选出高转移能力的亚系。请问，如何在transwell侵袭实验后收集细胞继续培养而不污染？

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感谢您的问题。
这篇文献很有意思，您方便贴出来看看嘛？
收集细胞可以用胰酶消化，无菌操作即可。

好的，是最近出的PLoS Genet. 2010 Mar 12;6(3):e1000879
全文可直接下载 cuturl('http://www.plosgenetics.org/article/info%3Adoi%2F10.1371%2Fjournal.pgen.1000879')
和大家共同学习探讨！

楼主你好,我现在正在做transwell，用的是24孔的那种。有两个问题。
1，发现24孔板有个普遍的现象就是内皮细胞好在孔的中间聚集成团，不知道您有没有什么好办法可以解决一下这个问题。
2，我做迁移实验，在用药6小时后，用PBS洗涤细胞，但是细胞貌似全被洗没了。不知道是否是未预热的PBS（4度）造成了细胞的脱黏附？
谢谢您的解答，也愿意与大家一起交流！

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感谢您的问题。
二十四孔板的上腔比较小，确实是细胞容易聚集在中间，可以试着种完了细胞轻轻吹一下。
冷PBS的确容易使细胞收缩，掉下来，但是却不至于完全把细胞洗没了，您可以看看是否是其它的因素如迁移时间过长等导致的这个结果。