[求助]肿瘤细胞复苏后的样子，类似脂滴，又似凋亡 - 经验共享

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标题:[求助]肿瘤细胞复苏后的样子，类似脂滴，又似凋亡

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发表于 2012-4-13 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室里的细胞冻存是现在4度半小时，然后-70°24h之后马上放到液氮中保存。细胞复苏是在37°，不过我一般会让温度到39度这样时间可以在1min内溶。养细胞的情况来看，还是比较好用的。

woshituzhu[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

是不是脂滴用油红染色看就清楚了，我觉得不是脂滴，而是空泡。

tianmei001[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

学习学习
我们现在都不是水浴的，直接用手撰着，很快就溶解了

redbutterfly[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的细胞就算不是刚复苏，在培养的过程中也会有这样的情况，老师们也没有统一的说法，就是说老化了

loli[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的细胞就算不是刚复苏，在培养的过程中也会有这样的情况，老师们也没有统一的说法，就是说老化了

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有两个原因：
1、细胞在你复苏之后就一直培养造成代数过长在一定时间之后会出现细胞比较“懒”具体就是细胞长得很慢基本不分裂慢慢的就出现胞内大量空泡的样子。

对于这种情况的解决办法是重新复苏新的一管细胞注意掌握慢冻快融原则

2、是由于细胞营养不良所致具体是由于细胞培养液一直都是在同一个瓶子里配制的旧的快用完了新的培养液还继续往同一个瓶子里配最后就会导致细胞培养液体系发生一些变化

建议一段时间之后就换成新的培养瓶来配置培养液

或者也可以尝试着在原培养液里加一点非必需氨基酸non essential amino acid（Gibco），效果会有所改善。

另一个对于这种营养不良所致细胞空泡的解决方案是给细胞传传代随着状态比较好的细胞的生长那些状态不好的细胞会慢慢少去的

祝实验顺利！

jujuba[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有可能是自噬。
细胞饥饿的时候能够引发自噬。如果细胞在较低的温度下保存太长时间，再加上刚刚复苏后，细胞的状态不好，可能会发生这种现象。

jujuba[使用道具]
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发表于 2012-4-13 15:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

附件是细胞自噬的电镜照片：

希望大家指正。