小中大补充说明:
复苏细胞前在超净台里准备好培养液和离心管,以便冻存的细胞溶解后迅速能转移带离心管并快速加入培养基离心,细胞从-80℃冰箱拿出来迅速在37℃水浴箱里来回晃动融化,约1分钟完全溶解。由于复苏的细胞出现类似图片中的“空泡”,而在复苏后第一次传代的细胞中大大减少类似的“空泡”细胞,再加上之前细胞在-80℃冻存大约5个月,所以本人觉得还是细胞生长不良所致,本人推测可能是细胞器的“坏变”所致。
再补充理由:复苏的细胞需1周才能长满瓶底,传代的细胞3天即可。
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不同意见:复苏的细胞潜伏与倍增时间要看哪种细胞及用哪种培养液。我用DMEM/F12K养的结肠癌细胞复苏过夜就完成潜伏,进入倍增阶段即对数生长期。复苏细胞占25厘米方瓶的50%,24小时就长到80-90%。