小中大我想问一下楼主,你的培养液传代时有变颜色吗?细胞有没有明显的增值呢?我以前有次细胞感觉被污染了,但是觉得又不像,培养液养好几天都不怎么变颜色,呈桃红色,细胞也不怎么增值,也可以看到一些小亮点,后来我一个师兄看了后,说是已经污染了,而且应该是支原体污染。供你参考一下,楼主再仔细找下原因。
另外楼主说到是复苏后细胞才出现这种状况,所以有可能是你冻存前细胞有些轻微的污染,可能没发现吧~
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原来的培养基是从外面买的,也一直在用他们公司的,之前也没有出现什么问题。这一批次的培养基没开封之前颜色比较偏黄(感觉这里有点问题),但是加到培养皿里再在培养箱里放置一段时间后,颜色就是那种比较正常的红色,不是偏碱那种桃红,细胞复苏后第一次传代前后生长状态不错,但是以后增殖较以前明显变慢,而且养两天后,培养基颜色没有变化,还是红色。另外,我用的细胞是来自同一批冻存的细胞,之前用的几管都很好,所以应该和冻存无关。