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标题:[未解决]【求助】色谱柱柱效急剧下降

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
Doctorcbw[使用道具]
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【求助】色谱柱柱效急剧下降

一根新的色谱柱柱效急剧下降,第一天4万多,到第六天2万多,第十天只有5千多。流动相:磷酸盐:乙腈=96:4,pH约4.5.请高手指点是哪的问题?以前也做相同的样品但是没有问题,试剂也没有问题,现在二十天用了两根色谱住了。
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  • miracle   2012-4-21 00:41  可用分  +3   鼓励发起讨论,欢迎常来交流! ...
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unknow[使用道具]
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用完柱子有没有拿无盐的水好好冲冲。
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naren4545[使用道具]
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盐的比例太高了,冲洗不够!
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zhangsl226[使用道具]
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回复 #1 Doctorcbw 的帖子

你那个流动相比例中磷酸盐貌似太高了,磷酸盐对柱子很伤的
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DragonsABC[使用道具]
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水相的比例太高了,建议加大乙腈的比例到6%,柱效不好的柱子用同比例不含盐的流动相冲干净以后,用纯乙腈走几个小时,柱效应该是可以恢复的
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Dophin6179[使用道具]
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回复 #1 Doctorcbw 的帖子

一则缓冲盐比例较大,再则可能是连续做样没有对色谱柱进行较好维护,维护不当就会造成这样的结果。若长期使用这个流动相比例,建议两根色谱柱换着做,用完毕及时冲洗色谱柱,以提高性能,问题不大!
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emuchhh[使用道具]
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回复 #1 Doctorcbw 的帖子

C18的反相色谱柱水相比例太高容易导致填料的硅基卷曲,严重的会水解断裂。
还有一方面可能是样品的问题,有的样品比较伤柱子,建议在色谱柱前面加一个预柱。
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fengyan22[使用道具]
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回复 #1 Doctorcbw 的帖子

只要看你的柱子,
1、水相比例过高
2、缓冲液没冲洗干净
3、流速有没有改变
4、柱压是否正常,预柱是否该更换
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