小中大染色液的配制
1、鞭毛染色液
A液:单宁酸5.0g、FeC13 1.5g、蒸馏水100ml,福尔马林(15%)2.0ml、NaOH(1%)1.0ml。
配好后应当日使用,次日即效果差,第三日则不能使用。
B液:2%AgNO3溶液
待AgNO3溶解后,取出10ml备用。向其余的90ml AgNO3中滴入浓NH4OH,使之成为很浓厚的悬浮液,再继续滴加NH4OH,直到新形成的沉淀又重新刚刚溶解为止。再将10ml德用的AgNOa溶液慢慢滴入。此时会出理薄雾,轻轻摇动后,薄雾状沉淀又消失,再滴入AgNO3溶液直到摇动后仍呈现轻微而稳定的薄雾状沉淀为止。如所呈雾不重,此染液可使用一周;如雾重,则银盐沉淀出,不宜使用。
2、乳酸石炭酸棉蓝染色液
石炭酸2.0g、甘油40ml、乳酸(密度1.21)20ml、蒸馏水20ml、棉蓝(Cotton blue)0.05g
石炭酸在蒸馏水中加热溶解,然后加入乳酸和甘油,最后加入棉蓝,使其溶解即成。
3、富尔根氏(Feulgen)核染色液
(1)Schiff氏试剂:将1g碱性复红加于200ml煮沸的蒸馏水中,振荡5分钟,冷却至50℃左右过滤。加入1.0NHC120ml,摇匀。待冷至25℃时,加Na2S2O5(偏重亚硫酸钠)3g,摇匀后装在棕色瓶中,用黑纸包好,放于暗处过夜,此时试剂应为淡黄色(如为粉红色则不能用)。再用中性活性炭过滤,其滤液振荡1分钟后再过滤,滤液置于冷暗处备用。注意:过滤需在避光条件下进行。
在整个操作过程中所用的一切器皿都需十分洁净、干燥,以消除还原性物质。
(2)Schandium 固定液
取50ml升汞水溶液加95%酒精25ml。
B液:冰醋酸
取A液9ml加B液1ml,混匀后加热至60℃。
(3)亚硫酸水溶液
10%偏重亚硫酸钢水溶液5ml、1MHC115ml、蒸馏水100ml。
4、Albert氏异染颗粒染色液
A液:甲苯胺蓝0.15g、孔雀绿0.2g、95%酒精2ml、蒸馏水100ml先将甲苯胺蓝及孔雀绿溶解于酒精中,再加蒸馏水及冰醋,放置24小时,以滤纸过滤即可。
B液:先将碘化钾3g溶于10ml蒸馏水中,再加碘片2g,待溶解后,加蒸馏水至300ml。
5、Neiser氏异染颗粒染色液
A液:美蓝1g溶于95%酒精2ml后,加冰醋酸5ml及蒸馏水95ml,用滤纸过滤。
B液:斯麦褐0.2g溶于100℃蒸馏水100ml中,过滤。