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标题:[求助]细胞中的黑颗粒

misswu61[使用道具]
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发表于 2012-5-2 16:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一张，细胞上有黑颗粒，细胞间也有，不颤动！


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2012-5-2 16:59
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qumm1985[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的两张图焦距不同，轻轻来回动一下细调螺旋，黑点就没了。呵呵。丹心一，你看到的很可能是黑焦虫，如果是支原体，细胞培养液会变成发紫的红色，PH值变高。黑焦虫培养液不会有变化。你单独培养一下培养液，观察有没有你说的现象，如果有哪证明是培养液污染了，如果是支原体应该是血清里的，0.22的膜是无法除去支原体的。不过我还是倾向于认为它是黑焦虫，因为这个季节比较容易生长，春秋季。
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

以前用的国产显微镜感觉细胞形态还是很好的，换了进口的照的太清晰了，还有换了血清的品牌，有一些细胞裂解掉了搞得背景比较脏，细胞上有一些小疙瘩不知道是什么，消化以后再贴壁还是那样，细胞得肿瘤了？呵呵
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发表于 2012-5-2 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
污染是肯定的 我也遇到过。看着都吓人。你pbs洗完后，传代，大概大概6小时左右的时候，细胞贴吧状态还可以，但是在过2－4小时，细胞表面超多的灰尘状类似碎片的东西，覆盖细胞，要稍微摇晃一下才能看到细胞,
此时，若用pbs洗一下，发现细胞状态还可以，灰尘状的东西也少了 但很快又很多了。

具体是什么污染物尚待高手验证
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star#room[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我上面照片里的颗粒是不增多的，放一晚上放一天还是那么多，消化冲洗也去不掉
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你的培养液加双抗没有，如果没有，就用PBS洗下细胞，再加上含有双抗的培养液，也许能解决问题。
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发表于 2012-5-2 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
培养液浑浊吗？ 你的照片不很清楚，有没有使用莱卡的显微镜照的？

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谢谢楼上的，给你投一票！以前用的国产显微镜感觉细胞形态还是很好的，换了进口的照的太清晰了，还有换了血清的品牌，有一些细胞裂解掉了搞得背景比较脏，细胞上有一些小疙瘩不知道是什么，消化以后再贴壁还是那样，细胞得肿瘤了？呵呵

--------你说得碎片是因为换了显微镜才看到得还是说患了血清才造成的……你说的情况我也在去年得下半年开始遇到，不知道你使用得是什么牌子的血清，新生牛？ 小牛？ 还是胎牛？ 国产的还是进口得？
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jrwyyplt[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果不能解决问题，你就改下培养细胞的方法，让细胞状态好点。
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-5-2 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

还有一种可能是血清本身的原因，有可能是血清灭活时间太长，导致血清内的蛋白聚集。其实如果是胎牛血清，不需要灭活，同时还能保持血清中的营养成分，使细胞生长的更好，楼主可以试一下。
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2541[使用道具]
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 小中大
如果不能解决问题，你就改下培养细胞的方法，让细胞状态好点。

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怎么改变方法，具体是什么呢？
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