细胞世界

三楼的说 换液颗粒减少，但见快速生长，是什么快速增长呢，我用HBSS冲洗几遍后换液黑点不见增多呀，但是原代培养第二天神经元长的没有正常的形态，是那种肿大的，感觉像被什么掏空了，只剩个躯壳了那种，换液后慢慢开始好一点，有神经元正常的形态。

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比如你换液后，细胞周围洗得很干净了，但第二天又见小黑点出现。或者你用胰酶消化，吹打下来，离心后转移至新瓶。本来细胞贴壁后是干净的，但第二天细胞周围出现一点小黑点，两天以后都布满了。

我也遇到过这个问题，具体是什么至今还没有搞明白，这种东西在你细胞不是很多的时候可能不是很多，但是当你的细胞快长满，准备传代的时候他就会长得很快。这种污染不会让你的细胞死掉但是会影响细胞的生长速度，我们曾经试过换液时用pbs多洗几遍，然后加上四环素和乳酸环丙沙星，好像对这种黑色物质有抑制作用当时并不能除去，所以你还是把这一批细胞全部丢掉，拿一支第2代的细胞养，如果可能可以考虑换一下血清也换新的！培养箱最好也用酒精擦拭一遍！

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我认为你遇到的问题是黑胶虫污染，如果是支原体，细胞会成片死亡。如果是细胞衰老，细胞从培养开始就长得慢，即使颗粒少，也容易漂浮，容易聚集成团生长。四环素和乳酸环丙沙星对黑胶虫没有作用。最好还是采用如你后续的做法。