细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]求高手指点我的原代培养

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]求高手指点我的原代培养

sunnyB[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77335
精华 0
积分 581
帖子 862
信誉分 100
可用分 5059
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
11
 
说说我的组织块法:
1、组织块不一定很小,稍微大些没关系;
2、一定要锐利刀剪,对细胞伤害小;
3、最好用6孔板,把10块左右的组织均匀放置在一个孔内,液体不要加太多,以不超过组织块高度为宜,这样组织块就不会飘起来,第二、三天换液,方法同前,基本上组织块就能粘牢,以后可以逐渐增加液体量。我用这个方法做的基本上100%成功;
4、组织块掉了,可以马上转到另一个培养板继续按照组织块法培养;短期内一周换液没问题;液体变成黄色表示酸性物质增多,一般是大量细胞分泌代谢的结果,不变色并不代表营养充足,因为蛋白质在37度的半衰期是3天,即使没有细胞的液体37度一周后营养也差不多没了。
顶部
sunnyB[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77335
精华 0
积分 581
帖子 862
信誉分 100
可用分 5059
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
12
 
对不起啊,刚才忘记讲,我不想动孵箱内的细胞,还想给它加点液体....想出了一个很笨的方法,别笑话我,不知道是否可行,也请教一下吧:)
我在超净安全台内用吸管把含有血清的培养基准备好,直接在孵箱内把培养瓶的口拧开直接往里加液体...这样既不动培养瓶,又加了液,行不?是不是污染的风险太高了...

——————————————————————————-

风险太高。运气好的话,没事;运气不好,污染。
顶部
toy[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77357
精华 0
积分 716
帖子 1052
信誉分 100
可用分 6165
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
13
 
风险太高。运气好的话,没事;运气不好,污染。

_____________________________________________

呵呵
加进去以后还不是你想要的营养丰富的完全培养基

一般来讲
细胞量很少的话
可以1周换液
我们一般有的时候懒了
等液体有些发黄的时候才换液
顶部
33号[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74277
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4611
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-9
状态 离线
14
 
那我就暂时先不换液,液体的颜色清亮还没有变黄,差两天到一周,我再耐心的等等...不过,昨天晚上,我观察了一下,好像有少量的细胞贴壁了,但还没有完全延展开,我需要的是成纤维细胞,有十几个....这就算是原代培养成功了吗?老天啊,就让我成功一次吧.....
顶部