液相色谱

新买的迪马C18柱测定生物样本，使用不到一个月，岛津的色谱仪，有预柱；
有一次使用磷酸二氢钾的缓冲液（PH3.0）：乙腈（15:85）作为流动相，流速从0.2ml/min直接升到了1，压力突然升高，立即停泵，用乙腈-水（10:90）冲洗，压力降下来后，就梯度冲柱过夜（乙腈比例由10%到90%），第二天把水相比例调大以后，压力又升高了，
已经试过用90%水-乙腈，90%水-甲醇，纯乙腈，纯甲醇冲洗，柱压都没降下来；已经换了新预柱；
发现用0.2%的醋酸水溶液做水相的时候，压力下降2-3MPa，但换成水以后，又会有上升趋势，
到底是缓冲盐析出了，还是别的东西堵了啊，为什么我冲了这么久，柱压还是不降啊；各位大侠救命啊~~~

急求~~~，各位大侠~~

一般先堵预柱，拆掉预柱看看？

磷酸二氢钾的缓冲液（PH3.0）：乙腈（15:85）作为流动相


有机相比例过高了，缓冲盐当然会析出。

同学们，我昨晚用0.1%的三氟乙酸-乙腈（90：:10）冲了一晚，今天换同比例水冲，柱压下降了一些，联系客服说，可能我的柱子里不光是缓冲盐的问题，可能和没冲出来的蛋白液有关系，现在柱压比正常还要高一些，下一步排查一下泵的问题

估计是缓冲盐析出，外加样品析出，缓冲盐冲洗干净了，但是样品没有。考虑下你样品的溶解性，先洗洗柱子再说。