小中大又半个月了，实验还没任何进展。我也觉得或多或少会有点损失的，其他层面的细胞我也观察过了，可能也有一些星形细胞。昨晚用荧光显微镜观察了分到的细胞，不多。养的时候没看见菌，早上看了下已经有不少了，想500gX5min离心洗一下，没想到连个细胞的影都没有（昨天收集到的HSCs在1.5ml管底有小黄点大）？也不知道问题出在哪，最烦人的估计是染菌了，各个步骤都灭菌了，估计就是样品阶段出问题，取肝的时候手不干净。
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我个人觉得，肝脏在体灌注，然后放到管子里消化为止，还是很脏的。然后消化结束后，0.22micrometer过滤网，过滤得时候会把细菌类的去除掉。所以我觉得你污染应该是在过滤步骤以后的环节，没有达到无菌操作。请参考
不好意思，发现自己解释错了，消化结束后是用70micrometer的过滤网，这个大小只能把没有消化干净的大块的肝脏组织和其他大块垃圾去除掉，但是细胞，还有细菌类应该是去除不掉。
