小中大污染的问题:
这个问题我觉得跟实验室本身的条件,还有操作都有关系,因为我们实验室相对干净一点,动物都是SPF级别的,所以我上次试了消化液什么的没有用0.22micro过滤,配好了就直接用了,一开始培养基稍微脏,换过1次液后就没事了。所以,实验室本身的情节条件和操作当中的细节问题都很重要。
PronaseE和DNase的问题:我试了一次一个2个都不加,一个只加DNase。发现2个都不加的话,由于细胞中的genome和一些粘性蛋白的存在,细胞都成团,细胞大部分在消化结束,过滤大颗粒的时候卡在滤网。
只加DNase的话,虽然能够得到细胞,但是得率明显低于2个都加的情况。所以,我觉得这2个酶都是有存在的道理。