小中大你的纯度是什么时候计算的?用什么方法?确实一开始提取后荧光看的话纯度很高,然后等细胞活化后alpha-SMA 免疫染色,但是到了7天的时候,杂细胞会一簇一簇的分裂很多,比如kupper,比如fibro,一开始很少但是到了7天这个很少也会变很多。显然到了7天纯度不再是90%以上那么高了。不知道你有没有这个经验。
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这是常识,
我已经说过了,我只能让它尽可能的纯,我做不到一个杂细胞都没有,(谁能做到告诉我一声)
只要有它就会不停的分裂,到7天的时候自然会增多,
不过原代细胞对我没有用,我是做传1-3代的,纯度和数目对我来说都没有问题,
你既然要做原代的, 你就面临着鱼与熊掌的问题,你想提高纯度,得率不高;想有满意的得率,纯度会降低,除非你一天可以分他个三五只,
可以试着用CL2MDP去除枯否细胞,只是做脂质体本身不是一件轻松的事,
你明白实验中对照的重要意义了吧?