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标题:[求助]MTT试验中测IC50的意义和方法

daod[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 西子 于 2012-5-29 13:31 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

我前段时间也在做MTT,是在测骨髓基质干细胞诱导成骨成脂过程中的细胞生长情况。用的是96孔板,每空2×103,开始4天,OD值基本集中于0.7-0.9,后来,值陡然减小,基本在0.2-0.3徘徊,而且出来的曲线是锯齿型的,波动很大,请教,这是为什 ...

是在用MTT做细胞生长曲线吧?是不是细胞贴满了影响生长有死亡的?镜下看看细胞活性
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wu11998866[使用道具]
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我曾经向SCI(IF2.46)投寄了一篇文章,没有录用。文章中我使用MTT检测细胞增殖情况。 但返回意见说:MTT的检测结果不稳定,建议使用其他方法检测细胞增殖。我现在还是不清楚原因。看了楼上的,感觉有点开窍了。

不过这篇文章为什么在国内的SCI上能发表了啊?还是国外认真,向他们学习!
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misswu61[使用道具]
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MTT的检测结果不稳定,建议使用其他方法检测细胞增殖。

请问:其他哪些方法检测细胞增殖结果是稳定的呢?
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目前实验室常用的细胞活性测定方法包括MTT法、台盼蓝法、克隆形成法、放射性同位素掺入法等。

MTT法以其快速简便,不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的formazan为水不溶性的结晶体,需要加有机溶剂溶解,由于在去上清操作时会有可能带走小部分的formazan,故有时重复性略差。另外MTT反应这一步,至少需要3h,不适合于观察某种药物的急性作用。

特点:灵敏度高、经济。 缺点:由于MTT经还原所产生的甲臜产物不溶于水,需被溶解后才能检测。这不仅使工作量增加,也会对实验结果的准确性产生影响,而且溶解甲臜的有机溶剂对实验者也有损害。
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伊莎贝拉[使用道具]
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有没有群友用3H-Tdr掺入法做肿瘤细胞株的增殖?不知怎样确定干预药物的浓度,盼作过的群友指导下
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u234[使用道具]
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做全对照不就行了。3H-Tdr结果比MTT要稳定,但是也要重复多次才能有比较好结果。小心3H的半衰期要10多年,而且具有挥发性。实验要注意防护。
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用cck8比较好,XTT也比MTT敏感,就是成本高点
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woshituzhu[使用道具]
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听说CFSE标记,流式检测细胞增殖好
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yhz1973[使用道具]
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我曾经向SCI(IF2.46)投寄了一篇文章,没有录用。文章中我使用MTT检测细胞增殖情况。 但返回意见说:MTT的检测结果不稳定,建议使用其他方法检测细胞增殖。我现在还是不清楚原因。看了楼上的,感觉有点开窍了。

不过这篇文章为什么在国内的SCI上能发表了啊?还是国外认真,向他们学习!

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不妨应用一下SRB染色法,这是美国国立癌症机构推荐使用的方法
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wsll[使用道具]
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看了楼上各位的发言,我还是不明白为什么要测IC50,测得对癌细胞的清除率为50%时对应的样品浓度是为了说明什么问题呢?又能说明什么问题呢?
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