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标题:[求助]流式细胞结果分析,以及图形探讨

okhaha[使用道具]
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光看图不好说.要阳性%和平均荧光强度值再加统计才好说.看样子两组相差不大.另外对照是正常对照还是isotype?
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biabiade[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 okhaha 于 2012-5-29 13:55 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
光看图不好说.要阳性%和平均荧光强度值再加统计才好说.看样子两组相差不大.另外对照是正常对照还是isotype?

对照组为空白对照,未加任何抗体
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二丫头466[使用道具]
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你如果就展示这几个图是不可以发表的,由于你用了药物处理,因此可能会对背景荧光造成影响,所以每组都应该包括一个对照,因为你没给出对照的图,所以不知道是否做了,还是所有的实验就共用了一个阴性对照,如果都用一个对照应该是不可以的。

你这个最好不要做空白对照,因为特别是贴壁细胞,在消化下来时多少伤害细胞膜,非特异标记会比较明显,因此一定要做同型对照。在这种情况下,我比较赞同前面的意见,那个大峰很可能是背景峰,至于小峰是什么,我还觉得真难说,似乎是有一个群体表达了。

至于群友说的PMT1-SS或者PMT1-FS双参数来分离,我还没太搞懂。从你的细胞来看(散点图),是典型的细胞系表型,SSC和FSC比较均一,并没有在SSC和FSC上表现出不同,(则会两个指标表示细胞颗粒度盒细胞大小,是细胞本身固有的光学特性,因此细胞系中比较均一,无明显分群,而在外周血中,淋巴细胞,粒细胞和单核细胞仅靠这两个特征就可以清晰的分为3团),如果你能够上几个图讲解一下就好了。

呵呵,其实我本身也不操作流式,也想借机会多学习啊。
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乌贼老弟[使用道具]
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个人拙见:试验组2图均可见明显的主峰右侧的“肩峰”。不敢枉自断定它是阳性细胞细胞群体或者是阳性率较高的细胞群体,可以考虑用FL-1/ssc or fsc散点图来看看是否有分群现象,甚至可以通过该散点图作gate反过来看fsc/ssc上细胞群体的聚集现象。由于只有单一荧光,故只能这样分析了。分析方法还是用平均荧光强度来看相对客观!同时需要对照的支持。
但是,个人认为不能通过图中的M1、M2来分析!
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pencil菲[使用道具]
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个人认为:楼主的实验过程中,荧光抗体可能与细胞产生大量的非特异性结合,导致所有细胞均粘有荧光蛋白,整体峰值右移。楼主可以将细胞放到荧光显微镜下观察一下,不就清楚了?
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社会主义好[使用道具]
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请问PMT1-SS PMT1-FS SSC和FSC都是啥意思?那本书能看到讲详细的实验原理阿?
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社会主义好[使用道具]
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前面问题弄明白了。

FL-1/ssc or fsc散点图来看看是否有分群现象,甚至可以通过该散点图作gate反过来看fsc/ssc上细胞群体的聚集现象

请问这句话是啥意思啊
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