小中大回复 #31 zranqi_1 的帖子
已经很完备了,你可以当我的老师了,注意无菌操作和规范的实验管理,都是你的强项了。
1.杀几只大鼠,多准备些灭菌的PBS,移液管,离心管,酒精泡骨头的时间不能太长,酒精泡之前,别把骨端剪断,
2.5 ml无菌Tris-NH4Cl溶液悬浮细胞溶解红细胞,充分混匀2-3min,再静置。
3.关于TNf你可以不加,我又看了一些文献,很多人都不用,小鼠用的更多一些;或者收集前一天加入(个人认为TNF作用很大,长时间对细胞没好处)
4.il-10的剂量,10ug/L
5.你要根据你的实际情况决定实验的步骤和进度,一些事情只是原则。