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大家好，我是提出问题的搂住，我目前培养的DC基本成功，形态上可以确定,纯度也很高，但是不能确定是培养出来的是成熟还是不成熟得。
我用的是peprotech公司的因子,先将GM-CSF,IL-4配成浓度均为40ng/mlRPMI1640+10%FBS,抽自己的外周血单个核取帖壁细胞培养，隔天半换量，结果：
1，细胞在培养第三天就部分半悬浮，成簇，高倍镜能见清晰触角长须
2，第六天几乎所有细胞悬浮起来，细胞大部分成簇生长，也有小部分零散生长，几乎不见淋巴细胞和帖壁的成纤维或巨噬细胞，高倍镜能见悬浮细胞伸展出长触须，形态似园似椭圆或不规则。
3，流式测CD1a为85％
请问：
1，DC栽培养过程中会一直成簇生长吗，为什么我的从第2天开始成簇，之后一直成簇
2，悬浮起来的细胞一定是成熟的DC吗，我的细胞为什么悬浮的那么早，差不多第三天开始就部分悬浮了，第6天几乎全部悬浮，而我并没有加促成熟因子（如TNF,IFN等），难道是牛血清的促成熟的原因
3，CD1a是成熟DC还是非成熟DC还是所有DC的表达标志物,成熟和不成熟的CD1a表达有差异吗，
4，我按非成熟培养出来的DC根据悬浮成簇生长，高表达CD1a是不是能怀疑培养出来的DC是成熟DC而非成熟呢
谢谢各位！
