细胞世界

一个很菜的问题
筛网的目是怎样定义的？大小是多少？

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目是指１英寸的筛网上有多少过滤孔，２００目就是有２００个孔，１００目有１００个，目越多，筛孔径越小．好象２００目相当于０．７５um的直径．其实卖筛网的有一个很专业的玻璃刻度测量尺，一比就知道网是多少目的．这些你问一问卖筛网的老板，他们可是行家．同一种规格，进口国产的相差好多钱，一般按平方米买，要是作实验可以讲讲好话要上２块钱的就够用了．我曾经和老板们聊过，筛网用途众多，造纸＼中药筛选＼工程都会用到，医学实验只是其一小个领域罢了．兄弟以前也是什么都不懂，勇闯东大街后张了不少知识，大家同享．

终于找到组织了.
我也是做神经干细胞培养的,最近在做NESTIN免疫细胞化学,总是不成功,请各位高手指教.做出的片子细胞质没有染上,细胞核反倒很清晰,不知什么原因?
1.冲洗用PBS的PH值有要求么?多少?
2.用多聚赖氨酸包被的盖玻片,是马上可以接种细胞么?(我们是放于培养箱中3小时.)
3.DAB染色时间,说明书上说是5-20分钟,有没有确切的时间点呀?
4.一抗我们用的是1:100,是不是浓度问题呀?
还是其他方面出错了,请各位前辈指教,小妹在此先谢了.

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我是去年做的nestin免疫荧光染色，一次就成功了，步骤没什么特殊的，各文献上一样，照了好多漂亮的荧光照片，不知您的问题出在那里

我也要做神经元的培养，请教一个问题，神经干细胞无血清培养基的组成成分？是不是可以让神经干细胞选择性的生长（据有关资料说的）？

我用的完全无血清培养基的成分：DMEM/F12（1：1），2% B27 supplement，1% N2 supplement，青霉素、链霉素各100U/ml，EGF 20 ng/mL，b-FGF 10ng/mL。在无血清培养条件下只有神经干细胞能够长期存活，增殖，而神经元和胶质细胞则不能长期存活。

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我做海马神经元原代培养，用的是无血清培养基，Neurobasal培养液加入2% B27 supplement，同样只有神经元能够长期存活，抑制胶质细胞生长。

请问诸位，我导师因为国外的胎牛血清太贵不主张我买，我是该买四季青的胎牛好呢，还是买sigma的小牛血清？？

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如果有条件的话当然是买国外的好些了，国内的不同批次性能都是有差异的，而且需要灭活，国外血清不用灭活的。胎牛血清当然是比小牛血清好的，建议你如果有条件的话，买国外的胎牛血清。我用的是四季青的胎牛血清，有时候也碰运气。

请教各位高手:神经元的原代培养一定要加神经生长因子吗?价钱是不是很贵?

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有文献报道说在没有神经生长因子的体外培养环境中，神经元会在数天内死掉，建议还是要加的，sigma公司的NGF0.1mg256.5美金，大概3000多元。