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标题:[讨论帖]神经干细胞、神经元培养互助小组

orangecake[使用道具]
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发表于 2012-6-8 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

求教：我做Alzheimer的细胞模型，能做原代培养吗？怎么做呢？
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33号[使用道具]
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发表于 2012-6-8 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

各位大家好!我想养PC12细胞不知好不好养,在工作中要注意那些方面,还有在北京哪儿呢买到PC12细胞,贵吗?请大家多多帮助,多谢!
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是新手，是做海马（脑片）造模的。
我的问题是：1。选择多大的老鼠最好？
2。海马做切片好，还是不切片好？
3。用什么方式的膜片钳记录最好做？
4。细胞培养的问题，看些什么书或者文献，还有就是对于一个细胞培养新手来说，怎样开始实验，是先看书然后自己摸索还是去进修学习，还是怎样？

谁帮帮我啊

我没有做过海马脑片，但就我的经验，一个新手新开一项实验可能还是去看和学习现成的实验经验比较容易上手一些。
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hold住[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
各位大家好!我想养PC12细胞不知好不好养,在工作中要注意那些方面,还有在北京哪儿呢买到PC12细胞,贵吗?请大家多多帮助,多谢!

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PC12 细胞是比较好养的，也没有什么特别之处，就是无菌操作等一些和一般细胞培养相似的注意事项。我们用的培养基就是DMEM（高糖）＋10％胎牛血清（四季青），感觉还不错，长得挺好。我们的PC12从上海中科院细胞所买的，400块左右，估计北京也在这个价格附近。
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mamamiya[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请教各位前辈几个问题:
1MEM/F12与M199两种培养液培养NSCS有什么区别吗
2:我的培养液20%血清,80%m199镜下直接看就有许多细胞,正常吗
3:细胞接种密度对细胞培养有什么影响吗
4:细胞培养到何时加bFGF和EGF合适
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langlang[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教哪位战友做过多巴胺能神经元的无血清原代培养,实验需要无血清培养,可是细胞没有了营养物质我怀疑会活不长啊,有哪位战友能给予释疑,谢谢.
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请教有没有哪位群友用过beta淀粉样蛋白处理SH-SY5Y细胞？
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薄荷侠[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
将孕18天的Wistar大鼠脱颈处死，在无菌条件下剖腹取出子宫，PBS清洗3次。剪开羊膜取出仔鼠，切取胎头，分离出双侧海马组织，解剖镜下去除软脑膜后，用眼科剪剪碎海马组织。将海马碎块移入10ml试管中，用D-Hanks液冲洗。先后加入D-Hanks液4ml和0.25％的胰蛋白酶液4ml，用吸管轻轻吹打后置37℃培养箱中消化，其间摇动3次，15min后加入含10％胎牛血清的DMEM/F12中止消化，用吸管吹打细胞使之分散。150目筛过滤，收集滤液，1100r/min离心5min，弃上清。加入2ml DMEM/F12液（10％胎牛血清，2％B27，5g/L葡萄糖，0.5mmol/L谷氨酰胺，，15mmol/LHepes，100U/ml青霉素，100μg/ml链霉素），重新悬浮细胞，台盼兰染色后进行细胞计数，根据计数结果调整细胞浓度为5 105个/ml，接种于预先经多聚L-赖氨酸处理过的培养瓶中培养。用于神经原鉴定的细胞种植到用多聚L-赖氨酸包被过的盖玻片上。接种的第2天将培养液全部换成无血清培养液，以后每48h半量更换不含血清的DMEM培养液1次，每天观察记录培养细胞的生长状况。培养第5天时加入阿糖胞苷，使其终浓度为10μmol/L，以抑制胶质细胞的过渡繁殖，24h后更换全部培养液，即进行细胞鉴定。
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yonger[使用道具]
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发表于 2012-6-8 17:06 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是一名骨科医生,我的课题是想了解神经与骨折愈合的关系,其中,体外试验可能涉及到用神经生长因子诱导分化骨髓基质干细胞生成神经元样细胞或者胶质细胞,如果有可能性,请同道们,给出见议,不胜感激,如果不能做,我请放弃体外试验这部分.谢谢
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TNT[使用道具]
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 小中大
培养第5天时加入阿糖胞苷，使其终浓度为10μmol/L，以抑制胶质细胞的过渡繁殖”。如果不加阿糖胞苷，会抑制神经元的生长？
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