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标题:[求助]有谁在培养胰腺导管细胞吗?

eric930[使用道具]
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发表于 2012-6-24 10:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #20 鹅鹅鹅 的帖子

我是用DMEM/F12
(10%FBS+1%双抗)， 我看你是换无血清时间太短了，而且没有加烟碱，非常关键的一步。全程都要加，我发现加不加效果非常明显。
你要先让细胞长满，然后再换无血清的，文献上都是这样写的啊？！
但是我长满后再加无血清，长得特别慢，有时候死细胞成片把活细胞也拖走了。
所以也正在摸索。
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鹅鹅鹅[使用道具]
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发表于 2012-6-24 10:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也考虑过要换培养基，因为RPMI1640所含的成分比较少，再有我也发现更换无血清培养基后，细胞一下子死掉好多，所以现在我就让它先长，等长到差不多铺满再考虑是不是可以逐步降低血清浓度。
我的培养方案看来还是要调整一下。
PS:我们实验室马上可以腾出一间屋子作为无菌操作室杀动物，我就打算多做，用不同方法比较一下优劣。呵呵
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sunnyB[使用道具]
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发表于 2012-6-24 10:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我是个培养细胞的新手,想向您请教一下小鼠胰腺导管上皮细胞的培养方法,非常期待您的回复!
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