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标题:[求助]SH-SY5Y图片

tangxin_80[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
SH-SY5Y细胞刚开始长的慢，后来就快了。
圆形的有可能是未分化的，分化后就长出突起了，和PC12细胞很像。但是没有后者泼皮。消化和PC12细胞条件一样就行，它容易聚堆，所以还是用胰酶和EDTA的混合物较好，或者不含后者也可。1000rpm×5min即可。
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dog002[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
谢谢！
我现在犹豫着要不要在培养基里加HEPES，因为hepes毕竟是有点细胞毒性的。我用的DMEM/F12 1:1培养基，DMEM似乎特别容易变碱，开过几次瓶盖，溶液就有点发紫了！我用胰酶/EDTA混合物，消化下来仍旧有点成团，但不敢多吹打，但贴壁之后还比较均匀。
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hyuu[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

SH-SY5Y我养过，培养基DMEM中不用加HEPES，但是我觉得不能碱，否则状态不好。消化的时候一般用0.25%胰酶+0.2%EDTA混合物，复苏后的第一代长得慢，传代后就长得快了。
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我的sh-sy5y以前长得挺好的，用的国产的民海的血清，15%FBS，四天传代一次，复苏之后养的也可以。但是去年下半年我们的血清用完了，买了一批新的血清，也是民海的。然后今年我复苏sy-5y,它长得很慢，6-7天也才70%的密度（做一传二）。以前养得挺好的，现在也不知道是血清出了问题，还是怎么回事？我看大家都用进口血清养的，如果我要换进口血清，是不是要梯度换？怎么个换法？
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的细胞里面有黑色的颗粒，1640培养基 15%FBS PAA GOLD级 下一步怎么办 望指教


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2012-6-24 11:19
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-6-24 11:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您说不能碱，那PH值多少可以啊？
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