[求助]如何配制0.2％的II型胶原酶 - 经验共享

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标题:[求助]如何配制0.2％的II型胶原酶

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发表于 2012-6-30 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 sunnyB 于 2012-6-30 10:39 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

说的也是．反正试剂都准备好了．做做看吧.
不过骨髓基质细胞很好养的.

骨髓基质细胞好诱导嘛？要多久？纯度怎么样？

sunnyB[使用道具]
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发表于 2012-6-30 10:40 资料个人空间短消息加为好友

小中大

骨髓基质细胞好诱导嘛？要多久？纯度怎么样？

————————————————————————————————————

诱导不难，纯度不好说．不过要用好多试剂，也不太好买. 先那胎鼠试试吧.

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发表于 2012-6-30 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

诱导不难，纯度不好说．不过要用好多试剂，也不太好买. 先那胎鼠试试吧.

————————————————————————————————————————————————————————————————

我还想问下，要是做细胞的药物实验，看看在什么浓度范围内药物对成骨细胞没有产生明显的抑制作用，要做哪些方面的数据比较？比如细胞数、ALP含量等。

sunnyB[使用道具]
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发表于 2012-6-30 10:41 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1 你前面提到的那些都可以做做．流式测测细胞周期也不错．mtt要做也可以，不过我觉得mtt在说明细胞活力方面缺乏说服力，不如细胞生长曲线+细胞周期，经费足的话，买个BrdU试剂盒测细胞活力更有说服力，照片也漂亮（见图）.
2 当然这些是远远不够的. 还应该作些成骨细胞分泌产物的免疫组化，ＰＣＲ，western之类的较好．比如BMP，ＴＧＦ，胶原蛋白等表达的变化.
3 条件允许还可以做个电镜，看看细胞内部的变化.

附件

2012-6-30 10:42

42474343.snap.jpg (23.67 KB)

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发表于 2012-6-30 10:42 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我准备做一下几方面的比较:
1.细胞形态的观察，用相差显微镜
2.细胞增殖的测定，用MTT
3.ALP活性测定，用考马斯亮兰法
4.矿化功能测定，用茜素红染色。
你看够嘛？

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发表于 2012-6-30 10:43 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我准备做一下几方面的比较:
1.细胞形态的观察，用相差显微镜
2.细胞增殖的测定，用MTT
3.ALP活性测定，用考马斯亮兰法
4.矿化功能测定，用茜素红染色。
你看够嘛？

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少了点．如果仅仅是作为活力检测勉强够.

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