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标题:[求助]大家帮忙看看这是什么污染？从来没见过！

dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

崩解产物不应该是黑色的吧，我觉得

我想不一定是污染大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之。
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flower-201[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
显微镜下可以直接看见支原体么？
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

楼主所养的这株细胞形态上看起来与我养的MCF-7细胞有点相似,而且我也遇到过类似的问题.
我开始也以为是污染,可是细胞好象受这种小黑点的影响不大.
我发现每次消化过后这种现象严重些,换液后有会有改善.
如果消化时间长或瓶中细胞较多时,这种小黑点会凝聚成小团漂在上面,细胞的贴壁性也差些.
所以我也认同上面一位战友的观点:消化后部分细胞崩解,会释放出溶酶体一类的物质,肯定对细胞有一定影响,可以换液逐渐消除,还要把握好消化时间,可以减少这种现象发生.
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yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞小黑点是细胞浆里面有，随着细胞生长密度的增加小黑点就没有了，还有就是在培养皿里面传代没有发现小黑点，如果种到培养板里面刚开始细胞浆里面有小黑点，长2天，细胞比较密时胞浆里面就没有了
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xingyi08[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

支原体污染，楼主有兴趣就试一下支原体检测。如果还有好的细胞，赶快把这个扔掉。否则会在培养箱中传播很快。抗支原体的抗生素会可能有效。
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发表于 2012-7-7 16:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养的细胞也出现这种情况，但是我觉得不像上面的，大小差不多，但用200倍观察，呈圆形、中空、贴壁！用以每才能消化。而且越长越多，最后养的细胞五处生长，全漂了！
也在郁闷中，不知是什么，该如何处理！！


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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你所看到的“小黑点”，可能原因主要有以下几个方面：
1、可能与血清灭活有关，血清通常在56度30分钟灭活后会产生大量类似这种“小黑点”的东西，可用未灭活的血清进行试验以证明；
2、可能是细胞崩解的碎片，当细胞大量崩解后，细胞内的内容物会释放出来，如线粒体等，这个可以通过换液逐渐消除；
3、可能是支原体污染，如果在视野下你能看到这些“小黑点”在运动，那么支原体污染的可能性较大，这个可以加抗生素解决；
希望多少对你有所帮助

————————————————————————

楼主, 支原体污染应当是光镜下见不到的吧?
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发表于 2012-7-7 16:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们的细胞也出现过这种情况，具体是什么东西不清楚，应该不是黑胶虫，建议把培养基再过滤一下，把血清和滤过的培养基做一下无菌实验，各取0.5毫升，加到24孔板里，放到细胞培养箱里过夜，镜下观察一下。还有最好用一次性的无菌培养瓶，培养基和血清没有问题的话细胞就要重新复苏了，这个细胞不能用了。
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发表于 2012-7-7 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞也有这样的情况,不过我用培养基做过无菌实验,没有什么问题.我觉得是细胞裂解的细胞器,我用PBS洗,情况要好很多.而且每次消化后也加PBS把残留的胰酶洗掉,再换培养液就好多了.
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wsll[使用道具]
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发表于 2012-7-7 16:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
黑胶虫!
血清的原因.换血清!我曾经遇到过.如果不是特别能保证质量的血清一定要在56度灭活30分钟.
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