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标题:[求助]请教MTT的加药方法问题

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发表于 2012-7-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1ml稀释,浓度是0.156mol/L,稀释成1.28ml,得到的浓度是0.2mol/L,稀释后浓度怎么变大了呢?呵呵,不明白哦

楼主的方法并非不可以,只是这样各组间药物溶剂量好像是不一样的,难说对结果是否有影响

——————————————————————————————————————————————————

谢谢!是我算错了.我会重新算的.
我的药(粉剂)用碳酸氢钠溶后,就用培养液稀释成不同浓度,这样培养液就是溶剂,对结果应该是没影响的.
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发表于 2012-7-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

再请问各位前辈，干预药物是用完全培养基还是用不含血清的培养基稀释？谢谢。
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发表于 2012-7-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

看你是什么药物了
如果是抑制生长的药物,建议还是用完全培养基,因为撤血清后,细胞已经半死不活了,再给它喂毒药...... ,当然,撤血清也不是不可以,撤了血清抑制效果一般会比较明显,但要知道,在体内条件下,都是有血清存在的,所以如果是筛药的话,还是用完全培养基比较好
如果是促进生长的药物则用无血清的比较好,因为血清中有很多生长因子,往往会掩盖住药物本身的效果,如果你用的药物本身就是血清中的成分的话,就必须要用无血清的
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发表于 2012-7-12 13:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

类似的问题请教各位前辈：我加的药是注射液（国内外的类似文献都用它），配成的浓缩液最浓（２５０）的也仅为最高浓度作用液（１２５）的２倍，其余浓度（２５、５０、７５、１００）要用注射用水稀释．以保证每孔加入等体积药物．这样就存在每孔培养基被２倍稀释，可能会影响细胞的生长．可是还有什么更好的方案吗？
谢谢大家！
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发表于 2012-7-12 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培养基配成2乘的
也就是说配培养基的时候，同量的粉加一半量的水
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发表于 2012-7-12 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多谢．我加的药本身是高渗的，再加２乘培养基（高渗），是否对细胞损伤更大呢？还有个问题，因细胞培养中遇到了很多困难目前用的是买来的培养基，好象无法浓缩．
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发表于 2012-7-12 13:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
5。加药时切记所有的体积都要在2 ul以上，否则药物浓度肯定不准！

为啥是2 ul？不是1 ul？0.5 ul？ 请赐教？thanks

我记得有量程在0.1 ul - 2.5 ul之间的枪。

如这样的话，每次最少得配2ml加药培养液（溶剂是DMSO、或乙醇，终浓度低于0.1%），MTT试验一个浓度梯度设置6个孔，每次加药后会剩余800 ul 的含药培养基，如果有些药配制以后不能放置，那岂不浪费了。
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发表于 2012-7-12 13:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

先算好所用培养液总量，加药，混匀，再将孔板中的培养液换成已加入药物的培养液，避免加入微量液体,挂比,混合不均,而且这样才能保证每孔浓度一致。
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