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标题:[未解决]液相梯度洗脱,起始相为100%的水相对柱子损害大吗?

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
entd_jps[使用道具]
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液相梯度洗脱,起始相为100%的水相对柱子损害大吗?

我试验用的梯度洗脱,起始相为100%的水相,后来听一位老师说这样不可以,说是对柱子损害太大。为什么呀,好像我们实验室一直这样用
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visa[使用道具]
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一般情况下不用100%的水冲柱子,除非你的样品特殊,必须这样做。如果你用ods柱,流动相含水百分比不要超过90%,这是安全范围。如果你整个梯度含水比例都很大,都在90%以上的话,尽量保证时间不要超过2小时。高比例的水很容易伤害柱子,破坏柱子内部空间结构,柱效会快速下降。
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  • miracle   2009-6-9 11:08  专家分  +3   感谢您提供详细帮助
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绿茵ssein[使用道具]
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原来我们也是用100%水,可是两新根柱子可能都因为这个坏掉了,现在我们用甲醇-水(10:90)的冲,效果不错,放时间长了也不会生菌。而且甲醇含量低,冲盐也没事
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  • miracle   2009-6-10 15:13  专家分  +2   感谢您提供详细解答 欢迎您常来 ...
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j-1982[使用道具]
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回复 #1 entd_jps 的帖子

柱能不能用100%水冲请看柱的说明书,或者联系购货商。以前C18柱之所以要避免纯水(尤其是碱性环境)是因为作为C18的载体硅胶是溶于水的,时间长了柱会慢慢被瓦解掉。现在新出了很多耐水耐碱的柱子,据说是高纯硅胶,高密度C18键合,当纯水时由于极性的水与非极性的C18链的排斥作用使C18链平伏在硅胶上将硅胶保护起来就没事了。
比如我们现在用的柱子为了保留作用就经常从100%水走梯度,一年了都没事。
去了解自己的柱子吧,相信科技!
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  • miracle   2009-6-11 11:49  专家分  +3   感谢您的热心帮助
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swn_nyve_vb[使用道具]
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很大一部分的C18柱在被纯水冲的时候会造成柱床塌陷,所以尽量不要用纯水,除非厂家说明可以用纯水相做流动相~
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  • miracle   2009-6-11 14:04  专家分  +2   感谢您的热心应助
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有的柱子必须含5%的有机相。
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  • miracle   2009-6-12 18:36  专家分  +2   感谢您的应助 祝您心情愉快
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