[求助]大鼠平滑肌细胞培养 - 经验共享

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标题:[求助]大鼠平滑肌细胞培养

nn255[使用道具]
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发表于 2012-7-25 16:04 资料个人空间短消息加为好友

小中大

多谢多谢，觉得剥离的还是很干净的，就是今天剥离的时候有点儿用劲儿大了，不知道会不会影响细胞的活力，用的胎牛血清，是２０％的浓度，现在又担心血清浓度太高了会不会抑制细胞活力啊
担心中．．．．．．．．．．．．

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２０％浓度是不会的，应该采用20%的浓度。

rxcc33[使用道具]
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发表于 2012-7-25 16:05 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1、取大鼠胸主动脉，用两把普通尖镊撕扯就可以把外膜剥下来，内膜的剥离，我们用一把镊子夹住血管，用眼科剪将其剪开，然后用圆头的手术刀片轻刮几次就可以，内膜的剥离干净与否对平滑肌的培养影响不大。
2、没有必要去管面向上还是向下，将剪碎的血管均匀铺开就可以了，需要注意的是在铺展的时候，血管片断要保持湿润，这一点很关键。
3、要把握翻瓶的时机，可以孵育1-2小时在翻瓶，也可直接反，主要是看组织块的湿润程度，保证不脱离。5-7天就可以看到细胞从组织块周围爬出，纯化细胞，然后作细胞鉴定。

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