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标题:[未解决]【求助】荧光分光光度计的最低限

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
anxt2006[使用道具]
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发表于 2012-7-27 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】荧光分光光度计的最低限

我最近在用荧光分光光度计测大鼠血清皮质酮，做的标准曲线很乱，我将标准品稀释为40、30、20、15、10、7.5ug/100ml，想问下用荧光分光光度计最小能测到多少?我怎么知道稀释到多大读出的值才是有效的?谢谢。
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Tara0416[使用道具]
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发表于 2012-7-28 12:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 anxt2006 的帖子

荧光分光光度计不像紫外可见分光光度计，是以0.0044Abs为检测下限的。荧光分析依照样品的成分不同检测的下限浓度也不同。
一般而言，强度值在5以上即可。但是这个强度也是受狭缝，高压的影响的。
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awingerbo[使用道具]
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发表于 2012-7-30 10:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

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一般情况下可以达到PPt级，但也因样品种类而异，不能一概而论。如果测不出来，可以加大狭缝和高压，特别是加大狭缝可以提高检出极限。
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hg30717580[使用道具]
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发表于 2012-7-31 09:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 anxt2006 的帖子

和仪器本身灵敏度相关，以荧光素为参考标准，光度计测到几个pM应该是可以，测量时信号是噪声的10倍就可以定量，是噪声的3倍，可以视为检出。
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sacred[使用道具]
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发表于 2012-8-1 09:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #2 Tara0416 的帖子

依据JJG 537-2006 《荧光分光光度计检定规程》中描述：
用硫酸奎宁标准溶液检定仪器的检出极限：
配制A类单色器的仪器，其检出极限为5*10^(-10)g/mL
配制B累单色器的仪器，其检出极限为1*10^(-8)g/mL

注：A类是色散型单色器；B类是滤光片单色器。
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maomi520[使用道具]
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发表于 2012-8-3 09:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

回复 #1 anxt2006 的帖子

大荧光光谱仪，像美国PTI，英国EI，日本JY，其中PTI的灵敏度最高，检测极限为460amol荧光素（10-18），其他两家都在几百fmol,像一般的荧光分光光度计如F7000，PE,VARIAN的基本上在10-8到10-12级别。这些数据每个厂家的官方资料都有的。
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