细胞世界

跟我的细胞污染有点类似，但我的小虫子好好像只有成虫才有这么长的，活动很快，有些板孔的污染物也是生长很快的，但大部分没有这么快。

————————————————————————————————————————————————————————————————

战友你好，我看了你的图片，感觉我们的污染是一样的，你说的没错，只有成虫才这么大。我照得这张照片，是下午了，上午发现的虫子，随即将培养板拿出孵箱，下午照相时大部分虫子已经丧失活动能力，似乎死掉。
幼虫比较小，活动是翻滚和短距离游动，再大一点的游动很快，最大的活动慢一些，图片上大部分是最大的。

你现在细胞还有这种情况吗？我经过十天的探索，还是没有找到污染源，加强了无菌操作，情况有点好转，但仍有板孔污染，一孔污染，余功尽弃矣……

取材时消毒不严格，大肠杆菌污染了。

————————————————————————————————————————————————————————————————

斑竹你好，首先谢谢关注。我的疑问是：
1、大肠杆菌会很快的游动吗？会大小不一吗？照片是250倍光镜下照得，杆菌体积有这么大吗？ 镜下可以看到这些微生物在围攻分解细胞，可以在数十分钟内看到细胞被肢解的过程！
2、实验室老师看了说是某种原虫，我后来发现一个现象，即细胞分解殆尽，虫子死亡，时间也就一两天。
3、做了两个试验：拿到紫外灯下照射40分钟，不能杀尽，尚有活动的；朝培养基中加入大量酒精，虫子马上死亡，镜下可以证实。

细菌污染,肯定的,没商量,这样养可定不能行,特别是做临床,给肿瘤病人回输的DC,这种情况是绝对禁止发生的!!!
解决之道:
采血时严格消毒和无菌操作.严格细胞培养操作,一般可以避免这种情况了.如果感觉在操作中有什么不对的地方,加双抗,同时加入庆大霉素,那么一般是不会出事的了. 至于霉菌,DC一般具有相当的抗真菌活性,如果培养的DC有了真菌污染,则说明细胞培养的无菌操作要从头学起了.

————————————————————————————————————————————————————————————————

多谢关注！请看下我上面回帖的内容，您还觉得是细菌吗？
需要说明一点的是，我养DC已经成功过5次了，就是最近20天，接二连三出现同样的这种污染。实验室老师说以前他在小鼠腹腔中看到过这种虫子。
……我们楼上就是养动物的，我实验室里就有两个养老鼠的，经常拿着小鼠组织快进来……
从发贴至今，我又培养了三次，昨天分离培养的还好，但是四天前的，今早看又出现那些虫子了！！我恨不得用手把它们捏死！ 虽然镜下看，这些密密麻麻，蜿蜒 游动的虫子是很恐怖的！

杆菌污染，不信可以做革兰氏染色试试，我的也被污染过，你可以把培养液直接图片，染色看看，如果没有，就要注意勤灭菌和无菌操作，我的上次是没有救回来，损失惨重。

————————————————————————————————————————————————————————————————

现在无菌操作方面我是比以前十二倍的小心了，唉，奈何不尽人意。
或许***作流程太长吧，一次就要连着六七个小时……培养一次，要从早晨忙到晚上，顺便说，我们实验室洗瓶子、泡酸、消毒之类全是个人动手，这些我也做得很仔细了！累啊……出结果吧，神啊……

我从脐血培养的DC，但从没出现过这种情况，我一直用6孔板培养。我建议用进口的培养板，国产的较进口的本身就溶解一部分细胞。我养的8天就收细胞了，中间只换两次液，第一次吸出一半，第二次不再吸出而是加入原培基的一半。

———————————————————————————————————————————————————————————————

战友你好，你从脐血的哪种细胞培养分化DC呢？我是梯度离心、贴壁分离单核细胞，然后培养分化，若和我一样，可否留下电话，想请教！！