[求助]细胞复苏前，离心会对细胞有损伤吗？ - 经验共享

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标题:[求助]细胞复苏前，离心会对细胞有损伤吗？

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发表于 2012-7-30 16:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我亲自做过对照,我的细胞是在-80保存,为LO2细胞,用进口和国产DMSO(分析纯)分别冻存,时间约二周后复苏,进口DMSO(sigma)冻存的细胞基本没有影响,但国产DMSO冻存的细胞复苏后相差很大,没有离心的细胞长势实在不敢恭维呀,呵呵,个人建议如果用500ml包装的国产DMSO冻存的细胞还是离心吧!

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发表于 2012-7-30 16:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我没有离心去除DMSO，直接稀释至10％以下，这样比离心简单，但是细胞（SAOS－2，EC，SMC）复苏后到第一次传代都长得很慢，并且明显出现较多死细胞，第一次传代后细胞长势就很好了，应该是冻存、解冻和DMSO对细胞生长都有影响。平常离心的参数为1000rpm，5min，培养时死细胞较少，但是在液体的移取过程会损失少量细胞。从总得来说，离心应该优于直接稀释DMSO。个人观点哈

ero11[使用道具]
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发表于 2012-7-30 16:29 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们实验室配的冻存液一般10％DMSO，复苏细胞时，离心与不离心并没有太大区别，复苏后第二天换液就可以；离心毕竟对细胞是一种损伤，复苏对细胞已经是一种损伤，应该尽量减少第二次损伤，待细胞培养过夜恢复之后，再换液，不是很好吗？

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