细胞世界

先说AP的那两张：
处理后明显出现AP，但是应该是subG1，而不包括荧光强度很小的那群，因为细胞特点不一样，也不好就百分百排除，但是凋亡既然是精巧调控的PCD，其过程也是有规律的，所以发生凋亡的细胞的DNA loss程度也应该有生物聚集特性，而荧光强度低的那群很有可能是debris containing few DNA fragments，所以跟subG1区别很明显。如果是大流式，建议sorting出来sub-sub和subG1这两群，再拿回光镜下看应该区别很明显的。
至于细胞周期，都诱导凋亡了，cycle能不紊乱吗！所有期的细胞DNA都被切割，所以G2期荧光强度减弱至原来S期的强度，S期的减弱至G1甚至subG1，G1减弱至subG1。而不是S期增值旺盛，再说都凋亡了，还增值啥呀！多思考，想清楚，否则就出现明显的判断失误了。

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bohe老师说的极是，要多思考，想清楚，不过我对bohe老师的说法有些不同看法

1.关于周期紊乱的说法： 某些类型的细胞发生凋亡时具有细胞周期特异性，即有些药物只诱导处于某一细胞周期的细胞凋亡，当细胞凋亡发生在G0G1期时，subG1在GOG1前清晰可见，而选择性发生在S或G2的凋亡，能否用PI单染检测尚有不同看法

2.关于不是S期增值旺盛的说法：如果搂主的实验是选择性诱导G0G1期细胞凋亡，那么S期增值旺盛是有可能的，另外，搂主问的是和正常细胞比较，我的理解，这里的正常细胞应该是正常二倍体细胞，而不是未经诱导的实验组阴性对照细胞

欢迎批评指正，共同提高

非常感谢您的解答，请教cllly22，按道理讲凋亡增多，S期应该低吧，为什么反而高了那？做凋亡的那个老师说最前面的那个峰是凋亡，G0G1前面的亚二倍体峰不知是怎么回事。请问亚二倍体是怎么回事？多谢指教

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1. 多数情况下，可能是会出现按道理讲出现的情况，出现不按道理的结果未尝不是好事，再查一下你用的药物是诱导哪期细胞凋亡的，如果多次结果都如此，一定是有原因的，找找原因，可能你的科研会有突破,另你的正常对照是否为未诱导实验细胞？

2.最前面的峰不是凋亡，多是碎片，G0G1前面的亚二倍体峰就是GOG1前面的那个小峰，基本是正态分布的

3.亚二倍体和是正常二倍体相比较而言的，这就是为什么我们实验要做正常细胞的原因了，把凋亡峰的平均荧光强度与正常二倍体GOG1峰的平均荧光强度多比值，小于1.0，直观上亚二倍体峰在正常二倍体峰的前面。

4. 既然做了凋亡的实验，对细胞周期就应该有一定的了解，建议看一下这方面的基础内容

1.关于周期紊乱的说法： 某些类型的细胞发生凋亡时具有细胞周期特异性，即有些药物只诱导处于某一细胞周期的细胞凋亡，当细胞凋亡发生在G0G1期时，subG1在GOG1前清晰可见，而选择性发生在S或G2的凋亡，能否用PI单染检测尚有不同看法

2.关于不是S期增值旺盛的说法：如果搂主的实验是选择性诱导G0G1期细胞凋亡，那么S期增值旺盛是有可能的，另外，搂主问的是和正常细胞比较，我的理解，这里的正常细胞应该是正常二倍体细胞，而不是未经诱导的实验组阴性对照细胞

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判断周期是否紊乱最关键在于细胞DNA含量分布是否仍然保持相对规律，不管subG1出现没有，我们要判断细胞周期的变化总得还能准确清晰地分辨细胞周期啊。和第一张图相比，第二张图上从原来G1到G2的荧光强度分布区间里，细胞的分布早已没有规律可言，就算用cycle软件模拟，能看到的也是和分布曲线很不吻合的模拟“细胞周期”，反倒是细胞荧光强度呈相对连续无起伏的弥散分布，这是胞内DNA相对不规则损失的强有力证据，也就是说细胞群里每个细胞DNA含量都失去细胞周期的特有聚集性，无法呈现规律性，而只呈现相对随机性。那么怎么判断SPF呢？又怎么判断SPF显著增加呢？
另外，楼主说的正常细胞应该是指“正常”也就是没有诱导前的传代细胞（是不是肿瘤细胞就不知道了）。