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标题:[未解决]流速0.3ml/min时平衡柱子时基线很难平衡(非锯齿状)

  [未解决]本主题悬赏 可用分 10  
dragon5[使用道具]
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流速0.3ml/min时平衡柱子时基线很难平衡(非锯齿状)

最近在采用凝胶色谱检测生物大分子时,遇到一个非常棘手的问题,不知道该如何解决,希望各位高手能指点迷津、帮忙解决,不胜感激!

具体问题:
凝胶色谱柱:WATERS WAT011535(ultrahydrogelTM 1000,7.8X300mm)
流动相:10mM PB(pH 8.4)
流速:0.3ml/min
待检样品:多糖(分子量300KD)
温度:30

现象:
在流速0.3ml/min时平衡柱子时,基线很难平衡(非锯齿状),于是将流速调至0.5ml/min,基线快速达到平稳,于是再将流速调回到0.3ml/min是,基线出现锯齿状、波动及大,平衡很久,基线仍然无法平直。这会是什么问题,该如何解决啊?
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thereyoube[使用道具]
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可能是进气泡了,冲洗一下看看行不行
如果还不行,就打电话给仪器工程师处理吧
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  • miracle   2009-6-22 18:17  专家分  +2   thanks for the advice!
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kflsjjfdl[使用道具]
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锯齿状波动多大mv?一般噪声为0.002mv  在高10倍也算正常
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  • miracle   2009-6-23 14:07  专家分  +2   thanks for your help! 祝您心情愉快
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考研吧[使用道具]
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可能进气泡了。引起基线不稳
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  • miracle   2009-6-24 15:30  专家分  +2   thanks for the advice!
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zxlyid[使用道具]
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这个问题是只出现了今天这一次呢,还是每天你都是这个程序,每天都这样?如果只是今天出现这一次,正如楼上所说,很有可能是系统进气泡;如果每天都这样,我觉得是仪器出了问题,你用这样的流动相系统压力多少,我估计液相泵的密封圈不是很好了,很有可能有点漏液,或者漏气,也有可能系统某个部位或者整个系统很脏了,建议首先清洗下系统看看,然后在检查下泵处是不是有问题
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  • miracle   2009-6-25 18:55  专家分  +3   thanks for the advice!
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