小中大流速0.3ml/min时平衡柱子时基线很难平衡(非锯齿状)
最近在采用凝胶色谱检测生物大分子时,遇到一个非常棘手的问题,不知道该如何解决,希望各位高手能指点迷津、帮忙解决,不胜感激!
具体问题:
凝胶色谱柱:WATERS WAT011535(ultrahydrogelTM 1000,7.8X300mm)
流动相:10mM PB(pH 8.4)
流速:0.3ml/min
待检样品:多糖(分子量300KD)
温度:30
现象:
在流速0.3ml/min时平衡柱子时,基线很难平衡(非锯齿状),于是将流速调至0.5ml/min,基线快速达到平稳,于是再将流速调回到0.3ml/min是,基线出现锯齿状、波动及大,平衡很久,基线仍然无法平直。这会是什么问题,该如何解决啊?