【分享】酸化血清溶血试验

  实验原理

  阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者的红细胞由于膜的缺陷,对补体的敏感性增加,这些对补体敏感的红细胞能被正常血清所溶解,特别在血清酸性条件下(pH6.4-6.5)经37℃孵育,溶血更明显。

  实验方法

  材料:

  1.0.25mol/LHCL

  2.0.85%生理盐水

  3.离心机、试管、水浴箱等

  方法:

  1.取静脉血2-3ml,取下针头,将血轻轻注入试管中;

  2.离心吸出血清备用;

  3.将血块捣碎,用生理盐水洗涤3次,配成50%红细胞悬液备用;

  4.按下表进行操作;


  5.两管均加塞,置37℃水浴箱中1h后直接观察或者离心后观察结果。

  实验结果计算

  溶血为阳性,不溶血为阴性

  注意事项

  1.本实验不用抗凝血,因抗凝剂会阻碍溶血,降低敏感性,出现假阴性;

  2.血清酸化后立即塞紧管口,以防二氧化碳逸出;

  3.血清需新鲜,以免补体失活,造成假阴性;

  4.实验用具要干燥,针头要粗,红细胞悬液要直接滴入液体,不要沿管壁流下,以免溶血。