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标题:[求助]MTT的OD值

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-8-27 17:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1 换为无血清培养液,是为同步化.
2 我的细胞长得很快, 加药前已达90%.
3 加含药培养液200ul, 是为保证充足营养.
4 有种说法, 加MTT时要用含血清(5%)的培养液, 促进MTT的转换.
我见OD低, 就用了5%的培养液100ul+11uiMTT, 略有改善

另外, 请教你, 加MTT后不吸上清的SDS裂解法, 如何操作? 麻烦告我详情.
多谢!
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rxcc33[使用道具]
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发表于 2012-8-27 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.如果你的细胞90％以上都处于一个细胞周期，不需要同步化。
2.细胞加药前就90％那么加药24小时能够多少那，是不是细胞已经挤的不行啦。是不是细胞已经开始凋亡啦，这么多的细胞OD值那么小好像不对劲，是不是将细胞细胞或MTT液吸出去很多，导致OD值下降。
3.我觉的你可以细胞量少点用100ul溶解药物试试，但是一般药物要作用48小时。
4.这个或许有可能，不太清楚。

SDS裂解法可以茬茬文献。很多。
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-8-27 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1 怎样知道细胞90％以上都处于一个细胞周期?
2 细胞是贴壁细胞, 吸弃上清不会影响细胞吧, 是吗?
3 我就是用100ulDMSO溶解的
请您继续指点, 多谢!
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