细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 14  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:[讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊

麦丽素1986[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 80012
精华 0
积分 221
帖子 162
信誉分 100
可用分 1596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-19
状态 离线
1

发表于 2012-9-3 14:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊


我发现养悬浮细胞的人不多啊，有养过得互相交流一下啦，比如细胞培养，细胞形态等等
顶部
shenkunjie[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76942
精华 0
积分 712
帖子 1124
信誉分 100
可用分 6420
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
2

发表于 2012-9-3 14:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
悬浮细胞很好培养啊，而且生长密度比贴壁生长大。最省事的传代培养是不需要做消化处理，减少污染环节。
顶部
麦丽素1986[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 80012
精华 0
积分 221
帖子 162
信誉分 100
可用分 1596
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-19
状态 离线
3

发表于 2012-9-3 14:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我知道好养，可细胞在显微镜下是什么样的？感觉圆圆的，有空泡，像要死了的贴壁细胞。悬浮细胞在活力好的时候是什么状态啊？谢谢赐教！！如果活力不好又是什么样的？可否发个照片让我瞧瞧，嘻嘻
顶部
kulee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77361
精华 0
积分 615
帖子 849
信誉分 100
可用分 5127
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
4

发表于 2012-9-3 14:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

悬浮细胞在操作时，比贴壁细胞简单，不需要消化等步骤。
一般呈圆形，透光性好，发一张活性好的照片：


查看积分策略说明
附件
2012-9-3 14:08
12416890.jpg (24.26 KB)
 
顶部
kulee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77361
精华 0
积分 615
帖子 849
信誉分 100
可用分 5127
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
5

发表于 2012-9-3 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

再发一张活性差的照片，有些杂质，背景不干净：


查看积分策略说明
附件
2012-9-3 14:09
27887911.jpg (35.82 KB)
 
顶部
okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
6

发表于 2012-9-3 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

悬浮细胞传代是不用消化，可有时需离心，离心过程一样可能会发生污染。处于对数期的悬浮细胞不是很圆，光亮，边缘比较锐利；而状态不好的细胞比较暗，很圆，细胞内颗粒比较多，有的有空泡。偶养的是CHO，别的悬浮细胞是不是这样偶就不清楚了。
顶部
okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
7

发表于 2012-9-3 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

大家的悬浮细胞是用什么器皿来养的？养到多大规模呀，能达到多大密度？
顶部
yychen[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77452
精华 0
积分 516
帖子 751
信誉分 100
可用分 4495
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
8

发表于 2012-9-3 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

CHO细胞是贴壁的呀，照你的意思好象是悬浮的呀，不对吧，我养的是贴壁的呀。我想知道你的照片是不是CHO的，要是的话，我觉得不可能
顶部
okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
9

发表于 2012-9-3 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

CHO进行悬浮适应性培养后，就可以变成悬浮的了，用于表达目的蛋白，悬浮的比贴壁的优点多的多。
顶部
kulee[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77361
精华 0
积分 615
帖子 849
信誉分 100
可用分 5127
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
10

发表于 2012-9-3 14:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

悬浮细胞在离心时，关键是要注意离心速度，我一般选择800转/分,5min。一般认为离心速度越大，对细胞的损伤越大。
此外就是要注意无菌操作了，关键是打开和关闭离心管之前要烧一下管口。
培养瓶没有特殊要求，不象贴壁细胞需要防脱处理。我们使用的100ml玻璃培养瓶，是家门祖传的家宝，呵呵（物美价廉）。
顶部
 14  1/2 12››