小中大其实这个问题很简单。你收集细胞上清的目的是要测定上清中蛋白的活性。你依然可采用常规蛋白的一些方法。其中稍微改变就行了
1、收集细胞上清,可通过透析浓缩或者PEG6000沉淀浓缩,因为你的蛋白含量肯定低,所以第一步是要富集蛋白,便于纯化收集。
2、当浓缩后,就是纯化蛋白,可通过柱层析纯化,或硫酸铵沉淀纯化,以前者较好。
3、检测活性。
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你要检测含量,有ELISA就好呀,反正你的蛋白是抗体嘛。要是提取的话最好用rProteinA柱子,亲和层析效率特别高,既可富集又可纯化,经这一步后,蛋白纯度就能到90%以上。