细胞世界

我也准备培养骨髓间质细胞，并且准备用两种细胞共培养的方法诱导破骨细胞生成。但是有人说共培养方法很难，有那一位前辈知道共培养技术的，请多多赐教！另外，我想请问一下，不同种属来源的细胞能否进行共培养，是否存在细胞表面抗原相互排异的问题。

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当然不会，在体外没有免疫系统的参与，怎么会有排异？兄弟真是多虑

请教有养过小鼠的MSC的前辈吗？我养第一次用的是全骨髓培养，看得介绍说要多贴几天，我就原代5天换液贴的倒是不少不过什么样的都有！细胞很杂，我看都快满了，就准备传代可是怎么也消化不下来！吹打后下来了些，可是贴壁的和MSC的形态差太远了我就扔了。我想可能是贴壁时间太长杂细胞太多的缘故。第二次，做的2瓶一个是24小时头次换液，一个是48小时头次换液，杂细胞少了很多形态也不错特别是24小时的，有好多梭形的成一条线一样生长得，可是今天一消化还是下不来啊！有没有遇见过这种情况的前辈啊！
注：胰酶没问题（同时消化过别的细胞），培养用低糖DEME10%FBS除青连霉素，谷氨酰胺，不加其它成分。

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MSC贴壁能力超强，不容易消化，建议：
1、消化前用无血清培养液或PBS冲洗两遍以去除血清；
2、0。25%胰酶37度作用5-10分钟，如还不行可适当增加胰酶浓度或重新配制新鲜胰酶（胰酶配好后时间长了消化能力会下降）。

请问各位在原代培养骨髓间质细胞时第一次换液在何时？

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我做的是SD大鼠的msc,一般5天换半液，如果长的好可以换全液，原代不是很容易贴壁，前三天最好不动，而后观察再换液

请教，如果我要鉴定小鼠msc的表型，我买了cd14，cd34，cd31，MHCI，cd105，能说明问题吗？

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我们实验室用的是cd44,cd45这俩个指标比较好

我也在养骨髓基质细胞，你们觉得这种细胞原代和传代培养时形态改变大吗？原代培养时一般成梭形，像成纤维细胞，但传代后，细胞伸展开，体形变得较大，生长速度也减慢，这是正常现象吗？

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这种有可能是营养太少了。应该用10%的胎牛血清

我做的是小鼠的MSC，把骨髓冲洗出来后直接用全血培养。试过贴壁3天和5天后第一次换液。换液后发现那些梭形贴壁细胞居然大部分都变圆了，这是怎么回事？然后放个两三天后又有梭形细胞长出来，而且是形成克隆样的大小不等的团块。有的团块细胞密度很大，我就用胰酶消化想将其吹散，没想到第二天我的细胞又变圆了，只剩极少数还是梭形。这几天我都没敢去碰它，而且酶消化绝对没有过，当时只有大约30％的细胞被我吹打下来。这些细胞怎么一碰它就变圆？狂郁闷中！请求各位大侠相助！

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1、看看你的培养液配制有没有问题。
2、试试24小时后换液，可以去除很多杂细胞。
3、MSC很易贴壁，这时须注意胰酶活性，有没有在4度冰箱放置过久，或反复冻融影响活性，注意用胰酶前用PBS冲洗细胞两遍，胰酶消化停止时掌握好时机，不要过早，一般3-5分钟，看到细胞变圆及要脱落再加培养液终止。若胰酶消化不好，再吹打效果都不佳。
4、我没懂你说的全血培养。

我也在养骨髓基质细胞，你们觉得这种细胞原代和传代培养时形态改变大吗？原代培养时一般成梭形，像成纤维细胞，但传代后，细胞伸展开，体形变得较大，生长速度也减慢，这是正常现象吗？

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可能传代后细胞密度降低