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标题:【求助】细胞复苏后第二天要立即换液吗

baidukk[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】细胞复苏后第二天要立即换液吗


最近在复苏细胞，复苏后开始一两天细胞状态较好，可三四天后，细胞开始脱落。有人告诉我复苏后第二天就要换液，有人说复苏后千万不能动细胞，要等培养液变黄时换液。我该怎么作呢？
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2541[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

复苏细胞后第二天应该换液,以彻底清除残留的DMSO等对细胞有害的因素;
另外,从你操作来看,你三四天后,没有换液或传代,那么细胞长的太密了就会脱落.建议你2-3天换液,并观察细胞生长情况,如长满了就需要传代了,一般周期2-天.
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fklo83[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
复苏细胞后第二天应该换液,以彻底清除残留的DMSO等对细胞有害的因素;
同意
另外，如果你的细胞对DMSO敏感，建议复苏当时就离心以去除DMSO,这样细胞状态会好的
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vcve[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
复苏细胞当时就应该离心以去除DMSO！
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u234[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

复苏当时离心除去上清，换入新的培养基培养一天后大部分细胞均贴壁，这时候应该及时换液以出去残留的dmso，这样有利于细胞恢复。
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kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

复苏时是否离心主要看个人的习惯问题，但是复苏后的24小时之内一定要换液以去除残留的DMSO，在37℃条件下它对细胞的毒性是很大的。一般12小时以内细胞的贴壁都比较好了，这个时候就应该赶紧换液了。：）
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whitesheep[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室作过很多的细胞培养工作，也建过很多的细胞系，我们一般都是在复苏完毕后就马上作离心去掉DMSO，此物对细胞的影响很大。刚复苏的细胞非常脆弱，所以在操作时务必小心，复苏完后过一个周左右的时间再换液，频繁换液尤其是在细胞密度很小时，对细胞没有好处，因为media里面有细胞分泌的因子等有助于其生长的物质。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我在复苏时一般离心一次，去除上清，然后把细胞重悬，转入培养瓶内，再填加足够培养液，我想即使残留DMSO，应该也已经被稀释了吧，还会有毒害作用吗
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tangxin_80[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
复苏的时候可以直接移入培养瓶内培养，第二天就必须换液。但是，最好的办法是离心后去上清，再次重悬后离心，转入培养瓶内培养，这样第二天就无需换液，可以正常培养的时间换液传代。我一直用第二种方法，不错的。对细胞的损伤也小。
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gemei0115[使用道具]
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发表于 2012-9-12 13:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人认为应该复苏当时就离心以去除DMSO否则对细胞影响很大,以前试过复苏的时候不离心直接转入培养瓶里,结果第二天准备换液时发现细胞根本就不贴壁!
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