小中大这种问题我在培养细胞的过程中也遇到过。我个人认为：首先可以排除细菌污染的可能，细菌很小，污染后只看见培养基很浑浊，而且，一旦污染，很快就看到。即使在倒置显微镜下，培养基也是一团模糊。只有在高倍镜下，才能看到细菌形态，很小，一般是杆状（大肠杆菌类）或很小的球形（链球菌或葡萄球菌），一般情况下，密度很大从而使整个培养基都不透明。第二，是霉菌的可能性也很小，因为霉菌形态更容易辨认，一般肉眼就能看出。培养基内有絮状物，或很大的团状，丝状物。显微镜下可以看到长长的菌丝。
如果你的细胞培养过程中，培养基一直是透明的，只是时间长了会出现很多团状的类似死细胞的物质，那么一下两种可能最大：1 支原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。2 营养问题：也就是说，根本不是污染，而且营养环境造成的。营养环境当然包括多方面的因素，包括细胞培养中所接触的所有器械是不是洗干净，三蒸水的质量，血清的批次（内毒素含量），培养基的PH值、存放时间，细胞是否需要一些特殊的生长因子，CO2张力，甚至培养环境中是否存在有害气体等等。总之，一切不适于细胞生长的因素都可能造成细胞死亡或凋亡，从而使培养过程中出现一些死亡细胞的团块。
